本发明公开了一种热稳定性提升的多聚磷酸激酶突变体及应用，所述多聚磷酸激酶突变体是将SEQ ID NO.2所示氨基酸序列第59、68、190氨基酸进行单突变或多突变获得的。本发明多聚磷酸激酶突变体的热稳定性得到有效提升，能够保持更久的催化活性，相较于野生型的半衰期提升了2‑5倍，35℃下半衰期可达53h以上。本发明多聚磷酸激酶突变体在催化ATP合成中，反应2h，多聚磷酸激酶突变体Q59R/D68H/T190Y的ADP转化率可达80.57％。本发明有效提升了多聚磷酸激酶的热稳定性，有助于降低直接使用ATP的工业化生产成本，在依赖ATP循环系统的工业化生产中具有良好的应用前景。
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