本发明属于人工金属酶领域，公开了一种高效的脱卤过氧化物酶及其制备方法与应用。本发明所述脱卤过氧化物酶是利用运输氧功能的肌红蛋白作为蛋白质分子设计骨架，将肌红蛋白血红素活性中心附近43位突变为酪氨酸，同时将64位的组氨酸突变成酸性的天冬氨酸，从而构建具有催化功能的双点突变体蛋白F43Y/H64D Mb，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明所述人工脱卤过氧化物酶，能够在低H2O2浓度下数秒内催化卤代酚氧化成低毒的醌类产物，达到脱卤效果，在催化转化数相近的情况下，极大地提高了双突变体蛋白对卤代酚的亲和力，其催化效率比单点突变体蛋白明显提高，从而可以广泛应用到卤代酚类有机污染物的治理。
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