本发明涉及一种瞬时转染试剂及其应用,属于细胞生物学和生物技术领域。本发明的瞬时转染试剂,包括聚乙烯亚胺盐酸盐溶液、氯化钠溶液和氯化镁溶液;聚乙烯亚胺盐酸盐溶液的浓度为0.8~1.2mg/mL,pH为6.9~7.1,聚乙烯亚胺盐酸盐为PEI MAX 40K;氯化钠溶液的浓度为4.8~5.3mol/L;氯化镁溶液的浓度为0.8~1.2mol/L。本发明的瞬时转染试剂用于细胞转染时,具有较高的转染效率。由于聚乙烯亚胺盐酸盐的浓度较低,本发明的瞬时转染试剂具有较低的毒性。本发明的瞬时转染试剂是一种价廉、毒性小、转染效率高的瞬时转染试剂,可用于重组蛋白生产和基因治疗等方面。