摘要
本发明属于生物提取技术领域,具体涉及一种水山药中多酚氧化酶的提取工艺。步骤包括:取新鲜水山药加入磷酸缓冲液,再加入纤维素酶、PVPP、Triton X‑100和PEG6000后匀浆,冰浴浸提,冷冻离心,收集上清液即为山药多酚氧化酶粗酶液;将多酚氧化酶粗酶液置于冰浴中,缓慢加入硫酸铵,至30%的饱和度,去沉淀留上清液;继续加入硫酸铵至80%的饱和度,离心收集沉淀;将沉淀经透析处理后,离心截留分子量大于10 kDa的粗酶液,经纯化后得多酚氧化酶提取物。本申请以极易产生褐变的水山药为材料,提取并纯化山药中的多酚氧化酶。本申请山药多酚氧化酶的分子量约为32 kDa,达到了电泳纯。