发明专利已授权

一种获得已知序列侧翼未知序列的方法

📄 申请号：CN201510910524.9 📄 发布日：2026/06/05

著录项目信息

申请日

2015-12-10

公开号

CN105400771B

公开日

2018-06-08

申请人

三明学院

法律状态

已下证

专利类型

发明

主分类号

C12N15_10

IPC 分类号

C12N15_10

技术画像

所属领域

分子生物学技术分子生物学技术基因测序基因组学

应用场景

基因研究, 基因组学, 分子诊断, 遗传育种

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摘要

本发明公开了一种获得已知序列侧翼未知序列的方法，包括如下步骤：1）根据已知的序列设计两条特异性引物，标记为SP1和SP2，SP2带限制性内切酶识别位点，在SP2到边界序列之间设计一对反向PCR引物F1和D1；2）以基因组DNA为模板以任意一个兼并引物和特异的SP1引物，扩增得到PCR产物1；3）以所述PCR产物1为模板，使用特异的SP2引物和步骤2）中同种但加入限制性内切酶识别位点的兼并引物扩增得到PCR产物2；4）将PCR产物2酶切后加入T4连接酶环化，以此为模板，使用F1和D1引物扩增得到PCR产物3，从而获得所述侧翼序列。本发明提供方法具有以下优点：操作简易、成本低廉、成功率高、耗时短等。

权利要求书 (12项) 说明书附图

……

图1

图2

图3

法律状态时间线

一种来源于福建金线莲的焦磷酸合酶基因

当前第 / 件

一种来源于中国台湾金线莲的焦磷酸合酶基因

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