本发明属于肿瘤检测技术领域,公开了一种肿瘤细胞标志物miRNA‑21及肿瘤细胞的检测方法,纳米复合探针由金纳米粒子核、发夹DNA H1及摆臂Walker‑Blocker组成;DNA四面体复合物顶点连接发夹DNA H2;miRNA‑21为3D DNA Walker激活剂;Walker DNA、H1、H2的DNA步行器循环信号放大,对miRNA‑21的比率型、荧光拉曼双模式检测;金纳米粒子和DNA四面体结构进入肿瘤细胞内,对肿瘤细胞的比率型、荧光拉曼双模式成像检测。本发明结合3D DNA Walker纳米机器放大及DNA四面体纳米探针对肿瘤细胞标志物miRNA‑21及肿瘤细胞进行比率型、双模式检测。