本发明公开了一种腈水解酶在选择性催化6‑氯烟腈合成6‑氯烟酸中的应用及突变体,所述腈水解酶突变体是将SEQ ID NO.2所示氨基酸的第55位的丙氨酸突变为丝氨酸获得的。在最优体系下,腈水解酶对6‑氯烟腈的水解活力达450U/g(WCW),可催化300g/L 6‑氯烟腈合成6‑氯烟酸,产率为达92%,同时催化合成2‑氯烟酰胺浓度最高达4.8g/L;以腈水解酶突变体催化6‑氯烟腈时,活力达580U/g(WCW),可催化300g/L 6‑氯烟腈合成6‑氯烟酸,产率达99%,同时对2‑氯烟腈的水合活力消除,无2‑氯烟酰胺产生。