本发明公开了一种人工电子传递系统及其在促进P450酶羟基化反应中的应用。所述人工电子传递系统,包括不动杆菌(Acinetobacter sp.)的铁氧还蛋白还原酶FdR和铁氧还蛋白Fdx,且铁氧还蛋白还原酶FdR和铁氧还蛋白Fdx之间通过一段富含丙氨酸的多肽linkerⅠ连接制成FdR‑linkerⅠ‑Fdx形式的融合蛋白,本发明通过构建分子内部的递氢系统,获得了较为高效的电子传递效率,部分解决了P450单加氧酶催化反应中电子传递效率较低导致的整体催化速率较低的问题,该电子传递系统耦合CYP51、VDH等P450酶后,电子传递的耦合效率提升2‑10倍以上。
📄 2020113453787
📂 C07K19_00
👤 浙江工业大学
📅 2020-11-26
本发明公开了一种重组酯酶、编码基因、工程菌及在生产R‑酮洛芬中的应用,所述重组酯酶的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。本发明将含重组酯酶编码基因的工程菌经诱导发酵得到的湿菌体用缓冲液重悬后超声破碎提取的纯酶液为催化剂,以(R,S)‑酮洛芬乙酯为底物,以pH7.0‑9.0的缓冲溶液为反应介质构成反应体系,在20~60℃、120~240rpm条件下进行水解拆分反应,获得R‑酮洛芬,当底物浓度为1g/L时,30℃反应3h,得率为37.6%,产物的光学纯度为85.5%,手性选择性为R‑型。
📄 2022111623369
📂 C12N9_18
👤 浙江工业大学
📅 2022-09-23
本发明提供了一种酯酶在拆分(R,S)-5-己内酯中的应用,所述酯酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,其编码基因如SEQ ID NO.2所示。本发明酯酶基因可与表达载体连接构建得到含该基因的胞内表达重组质粒,再转化至大肠杆菌菌株中,获得重组大肠杆菌工程菌;该重组大肠杆菌经细胞破碎,分离纯化获得重组酯酶;该重组酯酶具有催化拆分(R,S)-5-己内酯的能力,可以获得(S)-5-己内酯,对映体过量值>98%和转化率达到49.6%,拆分效率和产品收率高。
📄 2019102177066
📂 C12P41_00
👤 浙江工业大学
📅 2019-03-21
本发明涉及生物农药合成技术领域,特别涉及一种酶法合成高粱素的方法。一种酶法合成高粱素的方法,包括如下步骤:a、强心酚三烯在甲基转移酶与甜菜碱的作用下,生成甲基强心酚三烯;b、甲基强心酚三烯在细胞色素P450酶作用下,生成二氢高粱素;c、二氢高粱素自身氧化为高粱素。本发明针对高粱素植物提取方法局限,开发了其酶法制备工艺。相对于传统路线,改工艺具有路线短、反应条件温和、环保等优点,这不仅显著的降低了高粱素生产成本,同时也提高了其工业生产中安全及绿色指数。
📄 2022105042823
📂 C12P7_66
👤 浙江工业大学
📅 2022-05-10
本发明公开了一种醇脱氢酶突变体及其在合成糠醇中的应用,所述的醇脱氢酶突变体氨基酸序列为SEQ ID NO.3所示。YahK‑Y114W突变体提高了对辅酶NADH的偏好性使其催化糠醛的效率可达到野生型使用辅酶NADPH的水平。以表达突变体YahK‑Y114W的湿菌体为生物催化剂,以500mM糠醛作为底物,以500mM的葡萄糖做为辅底物,以葡萄糖脱氢酶为辅助酶,以NADH作为辅酶构建反应体系,在30℃、600rpm条件下反应6h,糠醇得率可达到76.04%,与野生型酶相比,得率提高了12.59%,成功改变醇脱氢酶对辅酶的偏好性,大幅度提高催化活力。
📄 2023111046031
📂 C12N9_04
👤 浙江工业大学
📅 2023-08-30
本发明公开了一种克唑替尼手性中间体的制备方法及菌株,所述方法以白地霉(Geotrichum candidum)ZJPH1704经发酵培养获得的湿菌体为酶源,以2,6‑二氯‑3‑氟苯乙酮为底物,以甘油为辅助底物,以pH 6~9的缓冲液为反应介质构成反应体系,在25~50℃、150~250rpm条件下进行反应,反应结束后,将反应液分离纯化,获得(S)‑1‑(2,6‑二氯‑3‑氟苯基)乙醇;本发明利用白地霉ZJPH1704,制备所得产物的光学纯度高,可使反应产率提高至93%,e.e.值>99.9%。
📄 201711155979X
📂 C12P7_22
👤 浙江工业大学
📅 2017-11-20
本发明提供了一种解淀粉芽孢杆菌酯酶在拆分N-BOC-DL-α-氨基丁酸甲酯制备N-BOC-L-α-氨基丁酸甲酯的应用,所述解淀粉芽孢杆菌酯酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,以发酵培养获得的湿菌体经冷冻干燥后得到的冻干菌体为催化剂,外消旋N-BOC-α-氨基丁酸甲酯为底物,以pH7.5磷酸缓冲溶液为反应介质,在20-60℃、1000rpm条件下进行拆分制备N-BOC-L-α-氨基丁酸甲酯,对映体过量值>99%,N-BOC-L-α-氨基丁酸甲酯的质量收率达到95.6%。
📄 202010008780X
📂 C12P41_00
👤 浙江工业大学
📅 2020-01-06
本发明公开了一种酶催化快速合成硝基苯并咪唑类衍生物的方法,所述方法为:以物质的量之比为1:1~5的6‑硝基苯并咪唑与丙烯酸脂类化合物为原料,以脂肪酶Lipozyme RM IM为催化剂,以DMSO溶剂为反应溶剂,将脂肪酶Lipozyme RM IM均匀填充在微流控通道反应器的反应通道中,所述微流控通道反应器的反应通道内径为0.8~2.4mm,反应通道长为0.5~1.0m;使原料和反应溶剂连续通入反应通道中进行Michael加成反应,控制Michael加成反应温度为40~55℃,Michael加成反应时间为25~40min,在线收集反应液,反应液经常规后处理得到硝基苯并咪唑类衍生物。本发明具有反应时间短、选择性高及产率高的优点。
📄 2018115846317
📂 C12P17_10
👤 浙江工业大学
📅 2018-12-24
本发明公开了一种杂色曲霉(Aspergillus versicolor)ZJB16085及合成R-2-(4-羟基苯氧基)丙酸的应用,保藏编号CCTCC NO:M 2018408。本发明从腐植土中分离出有效转化R-2-苯氧基丙酸合成R-2-(4-羟基苯氧基)丙酸的杂色曲霉(Aspergillus versicolor)CCTCC NO:M 2018408,其在10g/L底物存在条件下,能合成4.5g/L的R-2-(4-羟基苯氧基)丙酸,转化率为45%。
📄 2018116357892
📂 C12N1_14
👤 浙江工业大学
📅 2018-12-29
本发明公开了一种纳米高分子‑双酶复合物及其制备与在(R)‑2‑羟基‑4‑苯基丁酸乙酯合成中的应用,以葡萄糖脱氢酶和来源于Saccharomyces cerevisiae CGMCC No.3361的羰基还原酶为双酶,以聚丙烯酸为载体,以1‑乙基‑3‑(3‑二甲基氨基丙基)碳二亚胺为交联剂,以磷酸盐缓冲液为反应介质,在20℃‑40℃、180‑220rpm摇床中混合搅拌10‑60min,获得纳米高分子‑双酶复合物。本发明高分子‑双酶复合物用于油水两相中羰基化合物的不对称还原反应,可以同时实现辅酶再生,该方法可以提高催化剂的稳定性,延长催化剂使用寿命,实现重复利用,提高生产效率。
📄 2020113271346
📂 C12N11_087
👤 浙江工业大学
📅 2020-11-24
本发明公开了一种腈水解酶突变体及在普瑞巴林手性中间体合成中的应用,属于生物工程技术领域。本发明以芜菁/高山南芥腈水解酶嵌合体BaNIT的三突变体BaNITmut为亲本,运用定点突变对127位点和260位点进行改造,所获得的腈水解酶突变体氨基酸序列如SEQ ID NO.4或SEQ ID NO.6或SEQ ID NO.8。相比于亲本腈水解酶,本发明提供的腈水酶突变体催化外消旋异丁基丁二腈的活力及温度稳定性分别有所提高;同时副产物(S)‑3‑氰基‑5‑甲基己酰胺含量减少;操作易于控制,生产成本低,产品光学纯度高,在高效催化异丁基丁二腈合成(S)‑3‑氰基‑5‑甲基己酸中具有良好的应用前景。
📄 2020100320503
📂 C12N9_78
👤 浙江工业大学
📅 2020-01-13
本发明公开了一种基于流动化学酶促胺解反应在线合成苯乙醇类β-氨基醇衍生物的方法:以甲醇为反应溶剂,以摩尔比为1:0.6~1.4的苯胺类化合物和氧化苯乙烯为原料,以脂肪酶Lipozyme RM IM为催化剂,将原料和反应溶剂置于注射器中,将脂肪酶Lipozyme RM IM均匀填充在微流控通道反应器的反应通道中,在注射泵的推动下使原料和反应溶剂连续通入反应通道器中进行开环反应,所述微流控通道反应器的反应通道内径为0.8~2.4mm,反应通道长为0.5~1.0m;控制开环反应温度为30~50℃,开环反应时间为10~30min,通过产物收集器在线收集反应液,反应液经常规后处理得到苯乙醇类β-氨基醇衍生物。本发明具有反应时间短、选择性高及产率高的优点。
📄 2018115853984
📂 C12P13_00
👤 浙江工业大学
📅 2018-12-24