本发明公开了一种米曲霉脂肪酶突变体及在拆分(R,S)‑2‑(4‑羟基苯氧基)丙酸酯制备(R)‑2‑(4‑羟基苯氧基)丙酸酯中的应用，所述突变体是将SEQ ID NO.1所示氨基酸序列第38位或第230位进行定点饱和单突变或多突变获得的。本发明通过比较突变体酶AOL‑3F38N、AOL‑3F38N‑V230R和未突变酶AOL‑3的水解能力，结果发现突变体酶AOL‑3F38N、AOL‑3F38N‑V230R的水解活性是未突变脂肪酶的3.4倍和4.0倍，改造后的脂肪酶的热稳定性在50℃以后表现的更好，(R)‑2‑(4‑羟基苯氧基)丙酸酯产率提高，更加适合工业化生产。
📄 2019102834956
📂 C12N9_20
👤 浙江工业大学
📅 2019-04-10
本发明公开了一种脂肪酶突变体及其在制备(S)‑2‑氯苯甘氨酸甲酯中的应用，该脂肪酶突变体由SEQ ID No.2所示氨基酸序列第157位的谷氨酰胺突变为苯丙氨酸，第189位的异亮氨酸突变为赖氨酸，且第154位的缬氨酸突变为天冬氨酸而获得。本发明通过分子对接和定点饱和突变，筛选获得了可明显缩短不对称水解反应时间且对R型2‑氯苯甘氨酸甲酯方拆分效率高、选择性高的脂肪酶突变体，该突变体在反应12h后(S)‑2‑氯苯甘氨酸甲酯的得率达到了72.81％，ee值为95.24％，相对于野生型来说，实现了活性的提高和选择性的反转，同时缩短了反应时间。
📄 2020100362224
📂 C12N9_20
👤 浙江工业大学
📅 2020-01-14
本发明公开了一种印迹脂肪酶及其应用，所述印迹脂肪酶按如下方法制备：将印迹分子加入脂肪酶酶液中，搅拌溶解，调节pH为7.2‑7.8，搅拌印迹反应完全后，加入大孔树脂，搅拌吸附完全后，将反应液过滤，滤饼洗涤干燥，即获得印迹脂肪酶；本发明以麦芽糖或蔗糖为印迹分子，与有机酸和酯类化合物为印迹分子比较，印迹体系不需要表面活性剂与醇类助溶剂，印迹分子在水溶液中与脂肪酶分子的结合更优。麦芽糖印迹的脂肪酶，催化低聚糖酯化的应用面较广，以蔗糖为例，催化其乙酯合成，酯化率与酯化选择性均优于未印迹的脂肪酶，本发明酯化率高达86.6％，酯化选择性高达85.4％。
📄 2018113149756
📂 C12N9_20
👤 浙江工业大学
📅 2018-11-06
本发明公开了一种南极假丝酵母脂肪酶B的固定化方法，所述方法将二甲基咪唑水溶液、硝酸锌水溶液与南极假丝酵母脂肪酶B混合，在25℃、200rpm磁力搅拌条件下反应30min，再加入非极性大孔吸附树脂和交联剂，在15-45℃、200rpm水浴条件下交联反应5h，真空抽滤机抽滤，滤饼干燥，获得固定化南极假丝酵母脂肪酶B；与市场上的现有商品固定化脂肪酶相比较，本发明制备的固定化脂肪酶有更高的酶活力，因此酶固定化方法具有良好的工业化应用前景。
📄 2019104405368
📂 C12N11_14
👤 浙江工业大学
📅 2019-05-24
本发明提供了一种米曲霉脂肪酶及在拆分制备布瓦西坦中间体的应用，所述米曲霉脂肪酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，以发酵培养获得的湿菌体经冷冻干燥后得到的干菌体为催化剂，外消旋2‑(2‑叔丁氧基‑2‑氧代乙基)戊酸甲酯为底物，以pH7.0磷酸缓冲溶液为反应介质，在20‑60℃、1000rpm条件下进行拆分制备布瓦西坦中间体R‑2‑(2‑叔丁氧基‑2‑氧代乙基)戊酸，质量收率达到49.5％，产物R‑2‑(2‑叔丁氧基‑2‑氧代乙基)戊酸经甲酯化后对映体过量值>99％。
📄 2019106059139
📂 C12N9_20
👤 浙江工业大学
📅 2019-07-05
本发明公开了一种印迹脂肪酶及其合成蔗糖‑6‑乙酯的应用，所述印迹脂肪酶按如下方法制备：向脂肪酶酶液中，加入脂肪酸、糖醇，搅拌使其混合均匀，调节混合酶液pH为6.5‑8.5，在20‑30℃恒温下，以120‑160转/分钟的速度搅拌10‑25分钟后，立刻加入大孔树脂，在25‑35℃恒温、60‑100转/分钟下搅拌吸附3‑6h，过滤，获得滤液和滤饼；滤饼用蒸馏水洗涤后，真空干燥，获得印迹脂肪酶；本发明以糖醇辅助，10‑18碳链脂肪酸为印迹分子在水相中印迹脂肪酶，明显提高了印迹酶在有机溶剂中催化酯化的性能，蔗糖酯化率可以提高10％左右，蔗糖酯的六位酯化率可以提高近10％。
📄 2020108099171
📂 C12N11_082
👤 浙江工业大学
📅 2020-08-13
本发明提供了一种脂肪酶在制备D-托品酸甲酯中的应用，所述脂肪酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，其编码基因如SEQ ID NO.2所示。以重组脂肪酶工程菌发酵培养获得的湿菌体经冷冻干燥后得到的冻干菌体为催化剂，外消旋托品酸甲酯为底物，以pH7.0磷酸缓冲溶液为反应介质，进行拆分制备D-托品酸甲酯，对映体过量值>99％，D-托品酸甲酯的收率达到95.0％。
📄 2019106876341
📂 C12P41_00
👤 浙江工业大学
📅 2019-07-29
本发明公开了一种用于水解磷脂的改性脂肪酶及其制备方法与应用，所述改性脂肪酶按如下方法制备：将脂肪酶水溶液调pH至3.5～4.5，室温静置1～2小时；然后在搅拌下滴加体积浓度为0.01‑1.0％的戊二醛水溶液后，室温静置1～3小时，离心，沉淀用去离子水洗涤，干燥至水含量5.0％以下，获得改性脂肪酶。本发明采用戊二醛与脂肪酶蛋白分子结合，引起酶蛋白空间构型的改变，对脂肪酶蛋白分子的空间构型进行物理改性，提高脂肪酶对磷脂的水解效果。本发明改性脂肪酶提高磷脂的亲水亲油平衡值，增强其乳化性能，从而制造亲水性强的磷脂食品乳化剂，大幅降低亲水磷脂的生产成本，经济效益明显。
📄 2022111806393
📂 C12N9_20
👤 浙江工业大学
📅 2022-09-27
本发明公开了一种脂肪酶催化在线合成环己醇类β-氨基醇衍生物的方法：以甲醇为反应溶剂，以苯胺类化合物和氧化环己烯为原料，以脂肪酶Lipozyme RM IM为催化剂，将原料和反应溶剂置于注射器中，将脂肪酶Lipozyme RM IM均匀填充在微流控通道反应器的反应通道中，在注射泵的推动下使原料和反应溶剂连续通入反应通道器中进行开环反应，所述微流控通道反应器的反应通道内径为0.8～2.4mm，反应通道长为0.5～1.0m；控制开环反应温度为30～50℃，开环反应时间为10～30min，通过产物收集器在线收集反应液，反应液经常规后处理得到环己醇类β-氨基醇衍生物。本发明具有反应时间短、选择性高及产率高的优点。
📄 2018115921958
📂 C12P13_00
👤 浙江工业大学
📅 2018-12-25
本发明公开了一种重组脂肪酶突变体、工程菌及其制备(2S,3R)‑N‑乙酰‑哌啶‑2,3‑二甲酸二甲酯应用，所述突变体是将SEQ ID NO.2所示氨基酸序列第140位、141位、144位、189位、第190位进行单突变或者组合突变获得的。该突变体相比于野生型酶在转化上述反应时催化活力和底物耐受性大大提高，反应进程耗时明显缩短。相比于化学法制备(S,S)‑2,8‑二氮杂双环[4,3,0]壬烷，本发明提供的技术所得产品立体选择性高，反应条件更加温和，对设备要求低，降低了反应成本，且对环境友好。
📄 2018109242201
📂 C12N9_20
👤 浙江工业大学
📅 2018-08-14
本发明公开了一种来源于嗜热踝节菌的脂肪酶突变体、编码基因及其在水解外消旋2‑羧乙基‑3‑氰基‑5‑甲基己酸乙酯合成(3S)‑2‑羧乙基‑3‑氰基‑5‑甲基己酸中的应用，所述突变体是将SEQ ID No.1所示氨基酸序列的第206位、207位和259位氨基酸中的一位或多位进行突变后获得。经过蛋白质分子改造，TTL立体选择性水解CNDE的活力由4.50U/mg提高到160.55U/mg，远高于目前已报道的脂肪酶水解CNDE的活力。因此，本发明所获得的突变体在高效催化CNDE合成普瑞巴林手性中间体(3S)‑2‑羧乙基‑3‑氰基‑5‑甲基己酸中具有良好的应用前景。
📄 2017100712851
📂 C12N9_20
👤 浙江工业大学
📅 2017-02-09
本发明公开了一种利用脂肪酶修复邻苯二甲酸酯污染土壤的方法，将脂肪酶加入邻苯二甲酸酯污染土壤中，调节土壤pH5.5‑8.5、质量含水量15‑45％，20‑50℃条件下恒温培养，降解土壤中邻苯二甲酸酯；本发明采用脂肪酶及固定化脂肪酶修复被PAEs污染的土壤，修复时间短、作用范围广、针对性强，修复过程可大部分维持土壤原有的肥力及生态功能，环境友好。本发明固定化脂肪酶在修复邻苯二甲酸酯类化合物污染土壤中，对不同的邻苯二甲酸酯均有较好的去除效率，各PAEs的去除率在33.3％～64.9％之间，修复范围广，修复效果好。
📄 2020116247936
📂 B09C1_08
👤 浙江工业大学
📅 2020-12-31
柿子坊 · 知识产权运营
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