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本发明筛选得到一种耐高温D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶突变体，增强了突变酶的半衰期，提高了酶对合成D‑阿洛酮糖所用底物D‑果糖的底物亲和力和转化效率，突变体酶A13S在50℃时的t1/2值300min，Tm值由野生酶的55.1℃分别上升为60.8℃，突变体酶最适温度上升为80℃，与野生酶相比提高了20℃；本发明通过突变改善野生酶高温下半衰期过短问题，突变酶相对作用时间长，扩展了相对稀少的酶库，展示了D‑果糖在合成D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶绿色环保、毒性低，副产物少的技术优势，克服了化学合成法易产生三废问题，具有重要的工业应用前景。

本发明涉及一种L-阿拉伯糖差向异构酶突变体，及其在微生物催化D-半乳糖异构化制备D-塔格糖中的应用。所述L-阿拉伯糖差向异构酶突变体，由所示氨基酸经定点突变而得，所述点突变位点为下列中的一个或多个：(1)第97位、(2)第189位、(3)第301位、(4)第409位和(5)第462位。本发明有益效果主要体现在：本发明提供了一种全新的差向异构酶及其突变体，以及其在制备塔格糖(D-tagatose)中的应用。该突变体具有高最适反应温度80℃，解决了现有酶无法在高温生产D-tagatose的技术难题。使用本突变体生产D-tagatose，底物浓度为600g/L时，产物得率最高可达79.7％，优于原始酶和其他突变酶的转化效果，具有较好工业应用前景。

本发明涉及一种新型耐高温D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶及突变体，及其在微生物催化D‑果糖异构化制备D‑阿洛酮糖(D‑psicose)中的应用。所属异构酶氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示；所述异构酶突变体由SEQ ID NO.3所示氨基酸经定点突变而得，所述点突变位点为下列中的一个或多个：(1)第106位、(2)第183位、(3)第211位、(4)第276位。本发明有益效果主要体现在：本发明提供了一种全新的耐高温D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶突变体，该突变体具有超高酶活和底物转化率，最适反应温度可达90℃。当底物浓度为700g/L，反应温度为85℃时，产物得率最高达67.14％。将重组酶进行固定化并连续催化300批次，转化率均大于67％。本发明解决了现有酶催化制备D‑psicose效率低下的难题，获得的优于文献报道的连续转化效果对提升D‑psicose工业化水平具有重要意义。

本发明涉及一种D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶突变体，及其在微生物催化D‑果糖异构化制备D‑阿洛酮糖中的应用。所述D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶突变体，由所示氨基酸经定点突变而得，所述点突变位点为下列中的一个或多个：(1)第242位、(2)第105位、(3)第210位、(4)第147位、(5)第184位。本发明有益效果主要体现在：本发明提供了一种全新的D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶及其突变体，该突变体具有高最适反应温度85℃，解决了现有酶无法在高温生产D‑psicose的技术难题。使用本突变体生产D‑psicose，产物得率最高可达40.1％，优于原始酶和其他突变酶的转化效果，具有较好工业应用前景。

本发明涉及一种具有较高热稳定性的D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶及其突变体A13S/V235I以及编码基因，以及在微生物催化D‑果糖异构化制备D‑阿洛酮糖中的应用，解决了目前D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶在工业生产中热稳定性差的技术问题。所述D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，所述D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶突变体由SEQ ID NO.2所示氨基酸经定点突变而得。本发明有益效果主要体现在：本发明提供了一种全新的热稳定性提高的D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶及其突变体，该突变体具有高最适反应温度70℃，解决了现有酶无法在高温生产或其在高温下迅速失活的阻碍制备D‑psicose的技术难题。热稳定性优于原始酶和其他突变酶，具有较好工业应用前景。

本发明公开了一种耐高温纤维二糖差向异构酶突变体及其应用，所述突变体是将SEQ ID No.1所示氨基酸序列第242位进行单突变获得的。本发明通过对来自Dictyoglomus thermophilum的纤维二糖差向异构酶(DiCE)进行分子改造，从中筛选出热稳定性提高的突变体，得到的突变体乳果糖转化效率显著提高，其中突变体A242L耐受80℃温度，乳果糖转化率为64.41％，具有良好的工业应用前景。