本发明公开了一种碱性果胶酶的高效率固定化方法，具体步骤为：首先制备纳米氧化硅分散液；将丙烯酰胺、N，N‑二甲基丙烯酰胺、甲基丙烯酸和去离子水混合搅拌得到单体水溶液，将其加入到分散液中，再加入引发剂，制得高分子包覆的纳米氧化硅微球，之后用戊二醛溶液处理，得到活化的高分子包覆的纳米氧化硅微球；配制质量浓度为1.5‑3.5％碱性果胶酶溶液，并和缓冲溶液混合后加入活化的高分子包覆的纳米氧化硅微球，500r/min转速下搅拌固定1‑5h，然后过滤，沉淀用去离子水洗涤感觉后，真空冷冻干燥，得到固定化碱性果胶酶。该方法制得的固定化果胶酶热稳定性好，酶失活小，且酶不易从载体脱落。
📄 201710596243X
📂 C12N11_14
👤 苏州凯邦生物技术有限公司
📅 2017-07-20
本发明公开了一种以单分散多孔聚苯乙烯微球为载体的固定化果胶酶的制备方法，涉及固定化酶制备领域，具体步骤为：首先采用种子溶胀聚合制备单分散多孔聚苯乙烯微球，并在聚苯乙烯种球溶胀时加入适量的邻苯二甲酰化壳聚糖，得到壳聚糖改性的单分散多孔聚苯乙烯微球；然后将其与果胶酶水溶液、缓冲液混合振荡处理，制得固定化果胶酶，该方法制得的固定化果胶酶，酶活性损失小，应用条件范围广，稳定性好，酶不易脱落，重复使用率高。
📄 2017105889203
📂 C12N11_10
👤 苏州凯邦生物技术有限公司
📅 2017-07-19
本发明公开了一种麦芽辅助果胶酶解提取枣汁的方法，该方法使用等外枣为原料，通过果胶酶解后，在使用不同粒度的麦芽粉辅助果胶酶的提汁，再通过在不同温度下挥发除去甲醇，最后得到枣汁。该方法以等外枣为原料通过合理安排酶解顺序，去除果胶酶枣汁提取过程中产生的大量甲醇，从而提高了等外枣的利用率，减少了果农损失。
📄 201710364907X
📂 A23L2_04
👤 陕西科技大学
📅 2017-05-22
一种利用共养生孢菌属细菌产果胶酶的方法，它涉及涉及一种果胶酶的生产方法。本发明提供了一种利用共养生孢菌属细菌产果胶酶的方法，该方法与现有技术相比具有工艺要求低、周期短、生产成本低的优势。产果胶酶的方法：一、将共养生孢菌属细菌HDYM‑13接种于魔芋粉培养基中；二、发酵培养、离心，取上清液即获得果胶酶。本发明魔芋粉培养基成分简单，只有魔芋粉、冰乙酸、硫酸铵和氯化钠，均为工业级原料，成本低廉。
📄 2018104468269
📂 C12N9_18
👤 黑龙江大学
📅 2018-05-11
本发明涉及一种新果胶酶的基因，所述基因为序列表中SEQ ID NO.1的核苷酸序列所示；或者是与SEQ ID NO.1所示核苷酸序列具有90％以上同源性且编码相同生物学功能蛋白质的序列；或者是能与SEQ ID NO.1所示核苷酸序列杂交且编码相同生物学功能蛋白质的序列。本发明如序列表中SEQ ID NO.1的核苷酸序列可以利用pET32载体和大肠杆菌表达菌株，实现了表达产物与增溶因子Trx融合，得到大量可溶形式的Trx‑果胶酶融合蛋白，并通过镍亲和层析和DEAE阴离子交换法纯化得到高纯度和高活性的重组果胶酶蛋白，为大量制备重组果胶酶提供基础。
📄 2019111973197
📂 C12N15_60
👤 怀化学院
📅 2019-11-29
本发明涉及一种重组果胶酶及其基因、重组载体、制备方法和应用，该基因至少含有下列核苷酸序列之一的DNA片：1)序列表中SEQ ID NO.1的核苷酸序列；2)与SEQ ID NO.1所示核苷酸序列具有90％以上同源性、且编码相同生物学功能蛋白质的核苷酸序列；或3)与SEQ ID NO.1所示核苷酸序列杂交且编码相同生物学功能蛋白质的核苷酸序列。按照本发明所述的基因序列进一步构建重组载体并转化酵母，可实现该重组果胶酶在高密度发酵条件下的组成型分泌表达，通过单纯的镍亲和纯化，即可得到纯度高于95％和蛋白浓度较高的活性蛋白，该活性蛋白在低温下具有很强的水解果胶活性，将为提高果汁的出汁率提供一种新型且高效的酶产品。
📄 2019111973248
📂 C12N9_18
👤 怀化学院
📅 2019-11-29
本发明涉及一种果胶酶人工序列及其表达方法和应用，该基因至少含有下列核苷酸序列之一的DNA片：1)序列表中SEQ ID NO.1的核苷酸序列；2)与SEQ ID NO.1所示核苷酸序列具有90％以上同源性、且编码相同生物学功能蛋白质的核苷酸序列；或3)与SEQ ID NO.1所示核苷酸序列杂交且编码相同生物学功能蛋白质的核苷酸序列。按照本发明所述的基因序列进一步构建重组载体并转化酵母，可实现该重组果胶酶在甲醇诱导下的分泌表达，通过DEAE阴离子交换纯化，可得到纯度高于95％活性重组果胶蛋白，该活性酶蛋白具有很强的澄清果汁的活性。
📄 2019112105755
📂 C12N15_60
👤 怀化学院
📅 2019-11-29
本发明涉及一种具有嗜冷（Cold-adapted）特性的内切型碱性果胶酶PelV307及其应用。所述果胶酶PelV307的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明提供的果胶酶PelV307氨基酸序列与已知功能的果胶酶的相似度只有56%。本发明所述的果胶酶最适反应温度为30℃，在0℃和10℃下的酶活力分别能达到30℃活性下的33.4%和68.6%。本发明所述果胶酶为碱性果胶酶，最适反应pH为8.6，降解方式为内切，降解产物为二糖和三糖，具有良好的应用前景。
📄 2019102110672
📂 C12N9_88
👤 青岛大学
📅 2019-03-20
柿子坊 · 知识产权运营
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