本发明公开了一种耐受有机溶剂的脂肪酶突变体及其编码基因与应用。本发明通过对野生型米根霉脂肪酶进行定点突变，筛选获得了有机溶剂耐受性显著提高且比活力更高的脂肪酶突变体G266C，实验表明，该脂肪酶突变体G266C分别在终浓度为50%（v/v）的甲醇、乙醇、异丙醇和丙酮中孵育30 min后，残留酶活分别为野生型米根霉脂肪酶的3.1、2.9、2.1和2.6倍，有机溶剂耐受性显著提高，且相对于野生型其酶活性更好，可应用于脂肪酸甲酯等生物柴油的合成，更适用于工业领域上的应用。
📄 2024114271981
📂 C12N9_20
👤 广东海洋大学
📅 2024-10-14
本发明公开了一种脂肪酶催化制备甘氨酸寡肽‑聚乙二醇共聚物的方法，属于材料科学领域。本发明使用蛋白酶为催化剂催化合成甘氨酸寡肽，然后在脂肪酶催化下，使得甘氨酸寡肽和聚乙二醇单甲醚发生聚合，在寡聚甘氨酸的末端接枝聚乙二醇，制备得到甘氨酸寡肽‑聚乙二醇共聚物，其中，所述脂肪酶为爪哇毛霉菌脂肪酶M、黑曲霉脂肪酶A、米曲霉脂肪酶、疏绵状嗜热丝孢菌脂肪酶中的任一种。甘氨酸寡肽‑聚乙二醇共聚物的产率达到45～75％。本发明方法涉及的合成步骤的催化剂为酶，具有反应条件温和、环境更友好、副反应少等优点，而且避免了繁琐的保护和去保护步骤，本发明提供了一种制备氨基酸聚肽‑聚乙二醇共聚物的新方法。
📄 2020111549944
📂 C12P21_00
👤 江南大学
📅 2020-10-26
本发明公开了一种脂肪酶突变体及其在去污方面的应用，属于酶工程技术领域。本发明脂肪酶突变体的热稳定性好、pH稳定性好、洗涤性能好，因此，本发明的脂肪酶突变体在去污、油脂加工、乳品加工、面食加工、肉类加工、药物合成、柴油合成、高分子合成、手性化合物合成、皮革生产、制备洗涤剂和造纸等方面均有很重要的应用。
📄 2019113526200
📂 C12N9_20
👤 江南大学
📅 2019-05-31
本发明公开了一种利用表面活性剂制备高酯化活性脂肪酶的方法，属于酶工程技术领域。本发明通过脂肪酶水溶液中添加不同的表面活性剂及不同的表面活性剂浓度，通过冷冻干燥获得具有高酯化活性的脂肪酶，以满足脂肪酶非水相催化的需要。将不具有酯化活性或者活性较低的各种微生物脂肪酶，在合适浓度下与适当浓度的表面活性剂进行混合处理，可获得酯化活性显著提高的脂肪酶，同时脂肪酶常见的水解活性也发生变化。酯化活性的提高使脂肪酶更适合工业化应用。
📄 2017104259907
📂 C12N9_96
👤 江南大学
📅 2017-06-08
本发明公开了一种改变脂肪酶催化活性的活性重塑方法，属于酶工程技术领域。本发明通过脂肪酶体外重塑过程中添加不同的调节因子，获得具有高酯化活性的重构脂肪酶，以满足脂肪酶非水相催化的需要。将不具有酯化活性或者活性较低的各种微生物脂肪酶，包括大肠杆菌工程菌外源表达的脂肪酶以及商品脂肪酶，经8M尿素变性处理，在复性过程中添加从华根霉细胞提取的膜环境复合物WTS，可获得酯化活性显著提高的活性重塑脂肪酶，同时脂肪酶常见的水解活性也发生变化。酯化活性的恢复使脂肪酶更适合工业化应用。
📄 2016102619532
📂 C12N9_20
👤 江南大学
📅 2016-04-25
本发明公开了一种米曲霉脂肪酶突变体及在拆分(R,S)‑2‑(4‑羟基苯氧基)丙酸酯制备(R)‑2‑(4‑羟基苯氧基)丙酸酯中的应用，所述突变体是将SEQ ID NO.1所示氨基酸序列第38位或第230位进行定点饱和单突变或多突变获得的。本发明通过比较突变体酶AOL‑3F38N、AOL‑3F38N‑V230R和未突变酶AOL‑3的水解能力，结果发现突变体酶AOL‑3F38N、AOL‑3F38N‑V230R的水解活性是未突变脂肪酶的3.4倍和4.0倍，改造后的脂肪酶的热稳定性在50℃以后表现的更好，(R)‑2‑(4‑羟基苯氧基)丙酸酯产率提高，更加适合工业化生产。
📄 2019102834956
📂 C12N9_20
👤 浙江工业大学
📅 2019-04-10
本发明公开了一种脂肪酶突变体及其在制备(S)‑2‑氯苯甘氨酸甲酯中的应用，该脂肪酶突变体由SEQ ID No.2所示氨基酸序列第157位的谷氨酰胺突变为苯丙氨酸，第189位的异亮氨酸突变为赖氨酸，且第154位的缬氨酸突变为天冬氨酸而获得。本发明通过分子对接和定点饱和突变，筛选获得了可明显缩短不对称水解反应时间且对R型2‑氯苯甘氨酸甲酯方拆分效率高、选择性高的脂肪酶突变体，该突变体在反应12h后(S)‑2‑氯苯甘氨酸甲酯的得率达到了72.81％，ee值为95.24％，相对于野生型来说，实现了活性的提高和选择性的反转，同时缩短了反应时间。
📄 2020100362224
📂 C12N9_20
👤 浙江工业大学
📅 2020-01-14
本发明公开了一种印迹脂肪酶及其应用，所述印迹脂肪酶按如下方法制备：将印迹分子加入脂肪酶酶液中，搅拌溶解，调节pH为7.2‑7.8，搅拌印迹反应完全后，加入大孔树脂，搅拌吸附完全后，将反应液过滤，滤饼洗涤干燥，即获得印迹脂肪酶；本发明以麦芽糖或蔗糖为印迹分子，与有机酸和酯类化合物为印迹分子比较，印迹体系不需要表面活性剂与醇类助溶剂，印迹分子在水溶液中与脂肪酶分子的结合更优。麦芽糖印迹的脂肪酶，催化低聚糖酯化的应用面较广，以蔗糖为例，催化其乙酯合成，酯化率与酯化选择性均优于未印迹的脂肪酶，本发明酯化率高达86.6％，酯化选择性高达85.4％。
📄 2018113149756
📂 C12N9_20
👤 浙江工业大学
📅 2018-11-06
本发明公开了一种南极假丝酵母脂肪酶B的固定化方法，所述方法将二甲基咪唑水溶液、硝酸锌水溶液与南极假丝酵母脂肪酶B混合，在25℃、200rpm磁力搅拌条件下反应30min，再加入非极性大孔吸附树脂和交联剂，在15-45℃、200rpm水浴条件下交联反应5h，真空抽滤机抽滤，滤饼干燥，获得固定化南极假丝酵母脂肪酶B；与市场上的现有商品固定化脂肪酶相比较，本发明制备的固定化脂肪酶有更高的酶活力，因此酶固定化方法具有良好的工业化应用前景。
📄 2019104405368
📂 C12N11_14
👤 浙江工业大学
📅 2019-05-24
本发明提供了一种米曲霉脂肪酶及在拆分制备布瓦西坦中间体的应用，所述米曲霉脂肪酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，以发酵培养获得的湿菌体经冷冻干燥后得到的干菌体为催化剂，外消旋2‑(2‑叔丁氧基‑2‑氧代乙基)戊酸甲酯为底物，以pH7.0磷酸缓冲溶液为反应介质，在20‑60℃、1000rpm条件下进行拆分制备布瓦西坦中间体R‑2‑(2‑叔丁氧基‑2‑氧代乙基)戊酸，质量收率达到49.5％，产物R‑2‑(2‑叔丁氧基‑2‑氧代乙基)戊酸经甲酯化后对映体过量值>99％。
📄 2019106059139
📂 C12N9_20
👤 浙江工业大学
📅 2019-07-05
本发明公开了一种印迹脂肪酶及其合成蔗糖‑6‑乙酯的应用，所述印迹脂肪酶按如下方法制备：向脂肪酶酶液中，加入脂肪酸、糖醇，搅拌使其混合均匀，调节混合酶液pH为6.5‑8.5，在20‑30℃恒温下，以120‑160转/分钟的速度搅拌10‑25分钟后，立刻加入大孔树脂，在25‑35℃恒温、60‑100转/分钟下搅拌吸附3‑6h，过滤，获得滤液和滤饼；滤饼用蒸馏水洗涤后，真空干燥，获得印迹脂肪酶；本发明以糖醇辅助，10‑18碳链脂肪酸为印迹分子在水相中印迹脂肪酶，明显提高了印迹酶在有机溶剂中催化酯化的性能，蔗糖酯化率可以提高10％左右，蔗糖酯的六位酯化率可以提高近10％。
📄 2020108099171
📂 C12N11_082
👤 浙江工业大学
📅 2020-08-13
本发明提供了一种脂肪酶在制备D-托品酸甲酯中的应用，所述脂肪酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，其编码基因如SEQ ID NO.2所示。以重组脂肪酶工程菌发酵培养获得的湿菌体经冷冻干燥后得到的冻干菌体为催化剂，外消旋托品酸甲酯为底物，以pH7.0磷酸缓冲溶液为反应介质，进行拆分制备D-托品酸甲酯，对映体过量值>99％，D-托品酸甲酯的收率达到95.0％。
📄 2019106876341
📂 C12P41_00
👤 浙江工业大学
📅 2019-07-29
柿子坊 · 知识产权运营
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