本发明公开了一株高产微生物油脂红酵母基因工程菌及其构建和培养方法。本发明以一株保藏编号为CCTCC NO:M 2019503、颜色突变的红酵母U13N3为出发菌株,通过设计特定gRNA序列,利用CRISPR/Cas9基因编辑系统,实现三酰甘油脂肪酶AOX2和ATG15功能同时缺失,构建了高产微生物油脂红酵母基因工程菌。本发明的红酵母基因工程菌,以甘油为碳源,发酵120h后胞内油脂含量最高达到0.854g/g干细胞,产油脂能力强,且由于出发菌株颜色突变,所提取油脂的色素含量低,简化了后续处理工艺,适用于工业化大规模生产。
📄 2020116013191
📂 C12N1_19
👤 南京理工大学
📅 2020-12-29
本发明属于医药技术领域,公开了一种熊果酮酸衍生物、微生物转化制备方法及应用。本发明利用微生物转化技术,以熊果酮酸为底物,区域选择性的在熊果酮酸母核C‑21位引入羰基或羟基。所引入的羟基基团还具有立体的选择性,均为β‑羟基。此外,还能在28位和13β位引入内酯,从而获得了结构新颖的熊果酮酸衍生物式Ⅰ—式Ⅳ。通过体外抗肿瘤细胞试验证实,化合物式Ⅰ—式Ⅳ具有显著的抗肿瘤活性,可以作为抗肿瘤药物的活性成分,具有广泛的用途。
📄 202310669593X
📂 C07J63_00
👤 南通大学
📅 2023-06-07
本发明属于医药技术领域,公开了一种乌苏烷型三萜类化合物、其微生物转化制备方法及应用,该乌苏烷型三萜类化合物同时具有11β,12β‑三元氧环和28,13β‑内酯。本发明利用微生物的酶体系,以熊果酮酸为底物,特异性的同时在乌苏烷型三萜母核11β,12β位引入三元氧环,在28,13β位引入内酯。此外,对乌苏烷型三萜母核非化学反应活性位点1位、7位和21位7成功地引入了羟基或双键,获得了七个结构新颖的乌苏烷型三萜化合物,并通过体外抗肿瘤细胞试验证实,七个化合物均具有显著的抗肿瘤活性,可以作为抗肿瘤药物的活性成分,具有广泛的医药用途。
📄 2023106695874
📂 C07J71_00
👤 南通大学
📅 2023-06-07
本发明公开了从乳酸合成纯聚乳酸的大肠杆菌工程菌及其制备方法和应用,大肠杆菌工程菌构建了由丙酰辅酶A转移酶突变体基因和聚羟基脂肪酸酯合成酶突变体基因融合表达构成的聚乳酸合成途径而获得。本发明并能够实现在生物体内以乙酰辅酶A为起始代谢物向聚乳酸的转化。本发明提供的突变体菌株内表达本发明提供的编码组成聚乳酸合成代谢途径中所有的酶的基因获得。本发明所构建的重组大肠杆菌菌株在兼性厌氧的条件下可利用含葡萄糖或甘油的丰富培养基为原料合成16%细胞干重。
📄 2021116809016
📂 C12N1_21
👤 淮阴工学院
📅 2021-12-31
本实用新型提出一种与生物转化装置配套的餐厨垃圾箱,包括无底面的箱体,箱体内分为若干个并列的独立功能区,每个功能区的上层与下层之间设有倒口,上层正面安装有卷帘门,上层顶板中央安装有满溢传感器,下层正面安装有平开门,下层内放置餐厨垃圾收集桶,餐厨垃圾收集桶放置在万向轮底盘上。本实用新型的餐厨垃圾收集桶与生物转化装置的养殖盆容量匹配,协同餐厨垃圾收集、运输和处置等环节,实现一收集桶的餐厨垃圾对应一个生物转化装置的养殖盆,同时利用卷帘门、电动机和满溢传感器、倒口等部件配合,解决了餐厨垃圾收集桶满溢和餐厨垃圾泼洒、四溅的问题,维护了餐厨垃圾收集点周围的环境卫生,并且解决了餐厨垃圾运输过程中的二次污染问题。(ESM)同样的发明创造已同日申请发明专利
📄 202020389596X
📂 B65F1_08
👤 江苏绿博低碳科技股份有限公司
📅 2020-03-25
本发明公开了一种重组酯酶、编码基因、工程菌及在生产R‑酮洛芬中的应用,所述重组酯酶的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。本发明将含重组酯酶编码基因的工程菌经诱导发酵得到的湿菌体用缓冲液重悬后超声破碎提取的纯酶液为催化剂,以(R,S)‑酮洛芬乙酯为底物,以pH7.0‑9.0的缓冲溶液为反应介质构成反应体系,在20~60℃、120~240rpm条件下进行水解拆分反应,获得R‑酮洛芬,当底物浓度为1g/L时,30℃反应3h,得率为37.6%,产物的光学纯度为85.5%,手性选择性为R‑型。
📄 2022111623369
📂 C12N9_18
👤 浙江工业大学
📅 2022-09-23
本发明涉及一种7‑DHC出胞分泌合成的酿酒酵母基因工程菌株,及其构建方法和应用。本发明构建了一株可向胞外高效转运7‑DHC的重组S.cerevisiae菌株sc13,利用其进行500mL摇瓶双相发酵时,7‑DHC总产量达到28.189mg/g(分泌量11.701mg/g),相较于对照sc1菌株,7‑DHC总产量提升14.54倍,胞外总分泌量提升13.77倍,其中胞外7‑DHC的分泌产量占比41.51%。由本发明构建的重组菌株具有更强的外分泌能力和更高的产量,对7‑DHC的合成以及简化7‑DHC的分离提取提供了指导思路,具有广阔的应用前景。
📄 2023100585156
📂 C12N1_19
👤 浙江工业大学
📅 2023-01-18
本发明公开了一种腈水解酶突变体、工程菌及其在合成(R)‑3‑氰基己酸中的应用,所述腈水解酶突变体是将SEQ ID NO.2所示氨基酸序列的第135位、第199位、第59位进行单突变或多突变获得的。本发明通过定向进化技术提升腈水解酶活性及立体选择性构建了腈水解酶突变体,与亲本腈水解酶PgNITmut相比,突变体PgNITmut/F135L对底物3‑氰基己腈的对映体选择率(E值)由332提升至419;突变体PgNITmut/F135L/R199W活力提升1.36倍,E值提升至461;突变体PgNITmut/F135L/R199W/T59D活力提升2.05倍,E值提升至569。本发明腈水解酶突变体具有较高的活性及立体选择性,利用高效腈水解酶法合成布瓦西坦手性中间体(R)‑3‑氰基己酸,大幅度降低工业化生产成本,在布瓦西坦工业化生产中具有良好的应用前景。
📄 2023102021266
📂 C12N9_78
👤 浙江工业大学
📅 2023-02-23
本发明涉及一种草铵膦脱氢酶突变体及其编码基因,以及利用该突变体构建的基因工程菌菌及其在催化PPO制备L‑草铵膦中的应用。所述突变体氨基酸序列如SEQ ID No.1所示,编码基因如SEQ ID No.2所示。本发明构建的基因工程菌E.coli BL21(DE3)/pETDuet‑1‑PPTGDHE3(A164G‑V354A‑R205K)‑GDH,具有高产草铵膦脱氢酶的性质,用于发酵罐生产,最高酶活力可达6605U/L,可用于微生物催化PPO制备L‑草铵膦,大大节约了成本,具有十分重要的产业价值和显著的社会效益;含草铵膦脱氢酶的固定化全细胞用于催化PPO生产L‑草铵膦,重复使用20次后,固定化细胞仍能保持100%的转化率,具有良好的工业化应用前景。
📄 2021110220135
📂 C12N9_06
👤 浙江工业大学
📅 2021-09-01
一种耐油酿酒酵母基因工程菌及其构建方法,属于生物工程技术领域。本发明公开了一株过表达Are2和Yft2基因的同时替换SEI1及Tgl1基因的酿酒酵母基因工程菌,所述酿酒酵母由原始酿酒酵母利用同源重组技术替换基因后改造而成。由于原始菌株BY4741自身存储甾醇类物质的量有限,并且过量积累的脂质中间体会产生产物抑制作用,不仅直接影响目标产物的合成,而且会引发细胞毒性,降低细胞活力。改造后的耐油酿酒酵母基因工程菌较原始出发菌株显著提升了细胞油脂存储单元脂滴结构的体积占比,有效地降低了脂质累积引起的细胞毒性和产物抑制,显著提升了酯类化合物的胞内累积量,为突破酯类类化合物酿酒酵母从头合成极限提供了新的策略以及良好的耐受细胞模型。
📄 2021113252655
📂 C12N1_19
👤 浙江工业大学
📅 2021-11-10
本发明公开了一种普鲁兰酶突变体、工程菌及其应用,所述普鲁兰酶突变体是将SEQ ID NO.1所示氨基酸序列的第365位、第401位、第504位或第499位氨基酸进行单突变或多突变获得的。本发明构建的普鲁兰酶突变体的催化活性、热稳定性与耐酸稳定性均得到了提高,其中突变体PulAR‑A365V‑401C‑H499A‑T504V的催化效率较野生型普鲁兰酶PulAR在pH5.0、6.0,60℃条件下分别提高了6.6倍与9.6倍;在60℃,65℃的半衰期分别比野生型普鲁兰酶提高了2.6和3.1倍,且在pH 4.5与pH 5.0的半衰期分别比野生型普鲁兰酶提高了1.6和1.8倍。
📄 2022102726722
📂 C12N9_44
👤 浙江工业大学
📅 2022-03-18
本发明公开了一种醛酮还原酶基因重组共表达载体、工程菌及其应用,所述重组共表达载体以质粒pET‑28b、质粒pETDuet‑1或质粒pCDFDuet‑1为基础,包含核苷酸序列为SEQ ID NO:1所示醛酮还原酶突变体基因和核苷酸序列为SEQ ID NO:3所示葡萄糖脱氢酶基因。本发明方法在双酶分开单独表达后组合催化方法的最大底物投料量50g/L(已在专利申请(201610124451.5)中公开)的基础上进一步提高到60g/L以上,同时双酶共表达体系有利于全细胞固定化,更具工业化应用前景。
📄 2017100499973
📂 C12N15_53
👤 浙江工业大学
📅 2017-01-21