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摘 要:本发明提供了一种对RNA分子进行绝对定量的高通量测序方法:RNA样品脱磷酸化;再通过T4 RNA连接酶,连接脱磷酸化的RNA与DNA接头1,捕捉95%以上的RNA;之后用去甲基化酶减少RNA修饰;再去除多余的接头1;然后以上述RNA为模板逆转录得到cDNA;再降解RNA模板;通过T4 DNA连接酶连接cDNA与发卡结构的DNA接头2,连接98%以上cDNA;再去除多余的接头2;最后进行PCR引物扩增并测序。本发明通过特殊设计DNA接头,克服了现有RNA测序技术中连接效率偏好性导致的无法精确定量,以及无法捕捉含有修饰位点的RNA分子的缺陷,实现了能够实现对不同来源的RNA样品中所有RNA分子进行绝对定量。本发明的方法简便,可用于临床分子诊断、分子生物学研究、细菌抗药性、癌症发生及预防等领域。
著 录 项:
专利/申请号: | CN201811145601.6 | 专利名称: | 一种对RNA分子进行绝对定量的高通量测序方法 |
申请日: | 2018-09-29 | 申请/专利权人 | |
专利类型: | 发明 | 地址: | |
专利状态: | 已下证 查询审查信息 | 分类号: | C12Q1/6851搜分类 R RNA分子 定量搜索 |
公开/公告日: | 转让价格: | 面议 | |
公开/公告号: | 交易状态: | 等待洽谈 搜索相似专利 |
交易方 | 企业 | 个人 |
买家 | 营业执照副本复印件(需盖公章) | 身份证复印件(签字) |
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卖家 | 营业执照副本复印件(需盖公章) | 身份证复印件(需申请人签字) |
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专利证原件(若授权下证) | 专利证原件(若授权下证) |
日期 | 法律信息 | 备注 |
2019/07/09 | 授权 | |
2019/02/01 | 实质审查的生效 | IPC(主分类): C12Q 1/6851 专利申请号: 201811145601.6 申请日: 2018.09.29 |
2019/01/08 | 公开 |