本发明属于生物医药技术领域,具体涉及一种结直肠癌抗体及其应用。所述抗体由骆驼源VHH‑3单域抗体与穿膜肽TAT通过柔性连接肽(GGGGS)3融合构成,其氨基酸序列如SEQ ID NO:9所示。本发明通过噬菌体展示技术筛选获得高亲和力VHH‑3(KD=0.9524 nM),并进一步构建穿膜纳米抗体TAT‑VHH‑3,利用原核表达系统实现可溶性高效制备。实验证实,TAT‑VHH‑3可显著抑制结直肠癌Caco‑2细胞的增殖(CCK‑8实验)和迁移(划痕实验),且呈浓度依赖性。本发明纳米抗体具有分子量小(约16.1 kDa)、穿透性强、稳定性高等优势,为靶向CaMKⅡα的肿瘤治疗提供了新型工具。