摘要
本发明公开了一种猪带绦虫Ts14‑3‑3.3 DNA疫苗制备及鉴定方法，属于基因工程疫苗技术领域，包含以下步骤：1）采用PAS法，全基因合成Ts14‑3‑3.3和sp‑Ts14‑3‑3.3；2）将目的基因克隆至真核表达载体，转入克隆菌株，挑取阳性克隆子测序鉴定和双酶切鉴定重组质粒；3）随后制备两种转染级别质粒，并分别转染人293F胚肾细胞，采用Western blot法鉴定；4）然后将小鼠分成4组；5）于首次免疫后0w、2w、4w、6w、8w收集小鼠血清和脾淋巴细胞进行鉴定。本发明成功制备了猪带绦虫pMZ‑X3‑Ts14‑3‑3.3和pMZ‑X3‑sp‑Ts14‑3‑3.3两种DNA疫苗。实现了猪带绦虫Ts14‑3‑3.3蛋白在人293F胚肾细胞中的表达。猪带绦虫pMZ‑X3‑Ts14‑3‑3.3和pMZ‑X3‑sp‑Ts14‑3‑3.3两种DNA疫苗均可诱导小鼠产生特异性的细胞免疫和体液免疫应答。
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