摘要
本发明公开了一种酶法合成西那卡塞中间体(R)‑1‑(1‑萘基)乙胺的方法,所用D‑氨基酸脱氢酶的基因序列和氨基酸序列如SEQ ID NO.1和NO.2所示,可通过构建大肠杆菌基因工程菌和发酵培养大量制备;在pH6.5~8.5的磷酸钾缓冲液中分别加入50~300mmol/L 1‑萘乙酮浓度,100~600mmol/L氨基供体,0.1‑0.5g/L辅酶,5%‑10%(V/V)助溶剂,1~3g/L辅酶循环酶,0.5~2g/L D‑氨基酸脱氢酶,在30~40℃下进行反应24~48h,生成(R)‑1‑(1‑萘基)乙胺,最终反应转化率大于95%,产物收率大于88%,产物手性纯度达到99%ee。本发明反应条件温和,有机溶剂用量小,反应体系更绿色环保,转化率高,大大提高了(R)‑1‑(1‑萘基)乙胺的制备效率,具有较好的工业应用前景。