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提供了一种催化活性和比酶活提高的脯氨酰内肽酶突变体，属于酶工程领域。通过将亲本米曲霉脯氨酰内肽酶的催化活性中心附近loop环上的亲水性氨基酸Thr370和/或Thr516用其他小分子量氨基酸或者疏水性氨基酸替换，或者将催化关键位点组氨酸His507附近的Cys508和/或Gln512突变成His508和/或Arg512，得到了一系列突变体。

本发明公开了一种检测氨肽酶N活性的比色方法，通过葫芦[8]脲识别结合多肽探针，以金纳米颗粒作为比色信号报告单元进行比色分析，进行氨肽酶N的活性检测。本发明所述的检测氨肽酶N活性的比色方法，方法简单、合理，基于多肽功能化金纳米颗粒/CB[8]超分子组装体，结合氨肽酶N对于多肽探针N‑末端中性氨基酸的识别切割活性，成功构建了一种新型的检测氨肽酶N活性的比色分析方法。实验结果表明，本发明构建的检测方法具有良好的灵敏度和可重复性，检测限可以达到0.096µg/mL。同时，还具有无需大型昂贵仪器和额外标记等优点，因而在临床分析检测中具有很高的应用前景。

本发明公开了家蚕羧肽酶抑制剂有效肽段和家蚕羧肽酶抑制剂及其应用，家蚕羧肽酶抑制剂有效肽段的氨基酸序列为酪氨酸‑甘氨酸‑缬氨酸‑丝氨酸，家蚕羧肽酶抑制剂的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，有效肽段与小分子抑制剂tak‑285位置重叠，研究发现有效肽段与家蚕羧肽酶抑制剂均可显著抑制胃癌细胞的增殖，能够作为胃癌的医药用途，为胃癌的治疗提供了新的药物，为昆虫来源物质抗肿瘤药物的开发提供了可能性。

本发明公开了一种产氨肽酶的乳酸菌及其在寡肽饲料发酵脱苦中的应用，乳酸菌是以屎肠球菌（Enterococcus faecium）为表达宿主，以pQE‑30为表达载体，重组了核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示的氨肽酶基因。本发明把产氨肽酶的乳酸菌工程菌应用于饲料发酵，使饲料富含寡肽，并对寡肽进行脱苦，既提高饲料的营养价值，又改善饲料的整体适口性，并进一步增加饲料的益生菌和益生元，具有极很高的应用前景。

本发明涉及蛋白质提取技术领域，为解决日本黄姑鱼加工过程中产生大量的副产物，资源利用率低的问题，提供一种日本黄姑鱼鱼鳔胶原蛋白源二肽基肽酶‑IV抑制肽的制备方法，包括以下步骤：(1)将日本黄姑鱼鱼鳔预处理，然后用5wt％的乙酸结合胃蛋白酶提取胶原蛋白，离心干燥，得日本黄姑鱼鱼鳔胶原蛋白；(2)利用复合酶对步骤(1)得到的日本黄姑鱼鱼鳔胶原蛋白进行酶解，得日本黄姑鱼鱼鳔胶原肽；(3)将日本黄姑鱼鱼鳔胶原肽结合二肽基肽酶筛选试剂盒，即得二肽基肽酶‑IV抑制肽。本发明以日本黄姑鱼鱼鳔为主要原料，通过较为高效的工艺制得二肽基肽酶‑IV抑制肽，该抑制肽具有很好的抑制二肽基肽酶‑4的作用，具有很好的抗高血糖的功效。

本发明公开了一种金枪鱼鱼卵二肽基肽酶Ⅳ抑制寡肽及其用途，该二肽基肽酶Ⅳ(DPP‑Ⅳ)抑制寡肽的氨基酸序列为Glu‑Ile‑Pro‑Gly‑Thr‑Arg‑Gly‑Pro‑Leu，分子量为939.07Da。本发明制备的金枪鱼鱼卵的二肽基肽酶Ⅳ(DPP‑Ⅳ)抑制寡肽可显著抑制DPP‑Ⅳ活力，降低模型小鼠餐后血糖水平，改善小鼠口服葡萄糖糖耐量和麦芽糖糖耐量，降低模型小鼠的甘油三酯(TG)和胆固醇(TC)的含量，且安全无毒副作用；可应用于制备治疗或者辅助治疗II型糖尿病的特殊医学用途食品、保健产品和药物。

本发明涉及蛋白质提取技术领域，为解决日本黄姑鱼加工过程中产生大量的副产物，资源利用率低的问题，提供一种生物源二肽基肽酶‑IV抑制剂的制备方法，包括以下步骤：(1)将日本黄姑鱼鱼皮预处理得鱼皮粉，然后将鱼皮粉提取胶原蛋白，离心干燥，得日本黄姑鱼鱼皮胶原蛋白；(2)利用复合酶对步骤(1)得到的日本黄姑鱼鱼皮胶原蛋白进行酶解，得日本黄姑鱼鱼皮胶原肽；(3)将日本黄姑鱼鱼皮胶原肽通过二肽基肽酶筛选试剂盒筛选，即得生物源二肽基肽酶‑IV抑制剂。本发明以日本黄姑鱼鱼皮为主要原料，通过较为高效的工艺制得二肽基肽酶‑IV抑制肽，该抑制肽具有很好的抑制二肽基肽酶‑4的作用，具有很好的抗高血糖的功效。