本发明公开了一种简单的碱性磷酸酶活性的检测方法。利用样本溶液中的碱性磷酸酶分析物在催化焦磷酸水解反应后，Cu2+因未被焦磷酸络合而可高效率抑制糖化酶活性，使得水溶性较低的淀粉不被糖化酶水解。反应溶液中的淀粉被滴加到纸微流控分析装置中后使得相应纸体发生从亲水性转变为疏水性的润湿性改变，进而使检测试剂溶液可流过该区域的体积降低，最终导致其在纸装置中的流动长度较短。纸装置中检测试剂溶液的流动长度反比于样本中碱性磷酸酶的活性大小，即完成碱性磷酸酶活性的定量检测。本发明方法简单易行，未经专业培训的操作人员也能开展实验，且不使用任何仪器进行定量信号读取，极大降低分析成本，具有广阔的应用前景。
📄 2016110390489
📂 G01N21_78
👤 桂林理工大学
📅 2016-11-24
本发明公开了一种碱性磷酸酶的灵敏检测方法，技术方案是，利用ALP对于磷酸基团的特异性，与AAPi反应生成抗坏血酸AA，然后，AA与DES反应产生较强荧光，从而实现对ALP活性的测定。本发明采用4,4'‑二叠氮二苯乙烯‑2,2'‑二磺酸二钠四水合物(DES)作为荧光探针，具有成本低、检测简单、灵敏度高等优点。本发明的方法具有假信号少、灵敏度高、选择性好、检测快速等优点。实验证明，本发明检测线性范围：5‑40mU/mL，相关系数为0.998，检出限1.46mU/mL，具有较高选择性和抗干扰能力，为后期应用于临床检测奠定重要基础。
📄 2020101758318
📂 G01N21_64
👤 河南中医药大学
📅 2020-03-13
一种多能干细胞碱性磷酸酶显色试剂盒，包括底座，所述底座的内部滑动设有试剂盒，所述试剂盒的内部设有放置座，所述放置座的上侧壁上均匀开设有若干放置腔，所述放置腔内设有试剂管，所述试剂盒的内部还设有摇晃组件，所述底座内设有保护组件。本实用新型与现有技术相比优点在于：将试剂管放入放置腔内后，通过摇晃组件可以对放置座上的多个试剂管同时进行摇晃，提高鉴定效率的同时节省了人力，通过设置的凹槽、滑块、减震弹簧和连接杆，使得试剂盒具备减震的能力，避免转运过程中发生颠簸时导致试剂管损坏，达到保护试剂管的目的。
📄 202420660262X
📂 B01F31_20
👤 安徽康普乐生物科技有限公司
📅 2024-04-01
本发明公开了一种栖热腔菌磷酸酶突变体及其应用，所述栖热腔菌磷酸酶突变体由来源于氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的野生型磷酸酶经突变所得，所述突变为以下一种：N212G或N212D。本发明栖热腔菌磷酸酶突变体对氨基葡萄糖‑6‑磷酸具有较高的催化活力(最高达1.64U/mg)，相对于其他磷酸单糖(葡萄糖‑6‑磷酸，葡萄糖‑1‑磷酸，果糖‑6‑磷酸)的酶活力提升不显著或者下降，从而其对氨基葡萄糖‑6‑磷酸的底物专一性较其亲本磷酸酶有了较大的提升。
📄 2021101004298
📂 C12N9_16
👤 浙江工业大学
📅 2021-01-25
本发明属于生物催化领域，具体涉及一种突尼斯污水鞘杆菌(Defluviitoga tunisiensis)来源的D‑阿洛酮糖6‑磷酸磷酸酶突变体及应用。所述D‑阿洛酮糖6‑磷酸磷酸酶突变体，以氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示的D‑阿洛酮糖6‑磷酸磷酸酶为模板，对其进行定点饱和突变得到；所述D‑阿洛酮糖6‑磷酸磷酸酶突变体的突变位点为下列之一或其中两种以上：(1)第160位的K突变为C；(2)第228位的S突变为A；(3)第48位的C突变为P。本发明提供的D‑阿洛酮糖6‑磷酸磷酸酶突变体在制备D‑阿洛酮糖时产率达到60％，产物中D‑阿洛酮糖与副产物果糖的比例由野生型的1:1提高到6:1。底物专一性调控后的磷酸酶突变体在体外多酶合成系统生产D‑阿洛酮糖中具有重要工业应用潜力。
📄 2024118910378
📂 C12N9_16
👤 浙江工业大学
📅 2024-12-20
本发明公开了一种磷酸酶突变体及在催化麦芽糊精制备甘露糖中的应用，所述突变体是将SEQ ID NO.1所示氨基酸的第175位、179位或195位进行单点突变获得的。本发明以含磷酸酶突变体编码基因的工程菌发酵培养获得的湿菌体经超声破碎提取的酶液为催化剂，以麦芽糊精为底物，联合葡聚糖磷酸化酶、葡萄糖磷酸变位酶、葡萄糖磷酸异构酶、甘露糖6‑磷酸异构酶，添加MgCl2和磷酸盐，以pH为7.5～8.5的缓冲液为反应介质构成反应体系，制备甘露糖。本发明磷酸酶突变体F179M通过体外一锅法以麦芽糊精为底物生产甘露糖，转化率达到60‑70％，产物甘露糖与副产物果糖、葡萄糖比例为11:1:1。
📄 2021108475583
📂 C12N9_16
👤 浙江工业大学
📅 2021-07-27
本发明公开了一种磷酸酶突变体及在体外多酶催化麦芽糊精制备果糖中的应用，所述突变体是将SEQ ID NO.1所示氨基酸的第173位、175位或179位进行单点突变获得的。本发明以含磷酸酶突变体编码基因的工程菌发酵培养获得的湿菌体经超声破碎提取的酶液为催化剂，以麦芽糊精为底物，联合葡聚糖磷酸化酶、葡萄糖磷酸变位酶、葡萄糖磷酸异构酶，添加MgCl2和磷酸盐，以pH为7.5～8.5的缓冲液为反应介质构成反应体系，制备果糖，转化率达到70％以上，产物中果糖与副产物葡萄糖比例为11:1。底物专一性调控后的磷酸酶突变体在体外多酶合成系统生产果糖的绿色合成中具有重要工业应用潜力。
📄 2021108476815
📂 C12N9_16
👤 浙江工业大学
📅 2021-07-27
本发明属于植物基因工程技术领域，具体涉及球孢白僵菌类钙调磷酸酶B亚基BbCNB、A亚基BbCNA基因在棉花和烟草育种中的应用。本发明通过构建上述基因的超量表达载体并整合到棉花和烟草基因组中，提高棉花和烟草植株的耐盐性。本发明还提供了改良棉花和烟草种子的植物表达载体，包括球孢白僵菌类钙调磷酸酶B亚基BbCNB、A亚基BbCNA基因编码的蛋白质，或表达该蛋白质的元件，或表达该蛋白质的载体，或表达该蛋白质的宿主细胞。本发明所述的球孢白僵菌类钙调磷酸酶B亚基BbCNB、A亚基BbCNA基因可以提高棉花和烟草的耐盐性，为棉花和烟草育种提供一种新选择。
📄 2018113808359
📂 C12N9_16
👤 西南大学
📅 2018-11-20
本发明属于碱性磷酸酶检测技术领域，公开了一种利用反蛋白石水凝胶薄膜检测碱性磷酸酶的方法，以夹心层的方法将充分混合的聚甲基丙烯酸羟乙酯、乙二醇二甲基丙烯酸酯及2‑羟基‑2‑甲基苯丙醇渗入光子晶体结构缝隙，紫外聚合反应后除去光子晶体模板，则得到具有有序大孔结构的薄膜；再利用该反蛋白石水凝胶薄膜检测碱性磷酸酶的方法，将对硝基苯磷酸二钠在40～70℃预热10min，并加入激活剂与碱性磷酸酶溶液，混合反应后，得到含有p‑NP分子的反应液；将反蛋白石水凝胶薄膜置入反应液中，反应后反蛋白石水凝胶薄膜颜色发生变化。解决以前比色法中的颜色对比度不强烈，不稳定等问题，具有简单携带和即时检测的特性，使其在家庭诊断等领域具有很高的应用价值。
📄 2021102116568
📂 G01N21_78
👤 陕西科技大学
📅 2021-02-25
本发明涉及一种基于点击化学和氧化石墨烯检测碱性磷酸酶的方法，属于生物分析检测技术领域。该方法利用磷酸化的抗坏血酸可以被碱性磷酸酶水解成抗坏血酸还原铜离子，催化点击化学反应的发生从而连接DNA短片段，因其连接前后在氧化石墨烯作用下荧光强度有明显变化，构建了一种新型检测碱性磷酸酶的荧光方法。本方法在0～1U/mL范围内有很好的线性响应，检测限为0.0036U/mL。本申请具有高特异性、稳定性好、成本低、操作简单等特点。
📄 2023108068834
📂 G01N21_64
👤 遵义医科大学
📅 2023-07-03
本发明涉及农业育种技术领域，具体涉及一种水稻类钙调磷酸酶B蛋白互作蛋白激酶及其在育种中的应用，水稻类钙调磷酸酶B蛋白互作蛋白激酶为CIPK17；CIPK17的过表达植株CIPK17‑OE2和CIPK17‑OE3在正常生长条件下表现为抑制植物的幼苗生长表型，CIPK17突变体CRISPR CIPK17‑41和CRISPR CIPK17‑44均表现与亲本表型相似，即幼苗生长正常，与野生型无异。CIPK17的材料在3μM甲基紫晶MV处理下，过表达植株CIPK17‑OE3和CIPK17‑OE9的幼苗生长表型明显好于亲本，CIPK17突变体CRISPR CIPK17‑41和CRISPR CIPK17‑44则与亲本表型相似。本发明通过实验证明CIPK17过表达株系和突变体，分别具有抗除草剂，幼苗生长好于亲本表型/正常表型及正常生长条件下，抑制幼苗生长的表型/正常表型，通过对水稻CIPK17进行转基因研究分析，筛选出需要的水稻种子进行培育，选种准确，节省时间。
📄 2021111498523
📂 C12N9_12
👤 南通大学
📅 2021-09-29
大蒜紫色酸性磷酸酶AsPAP基因及其在提高大蒜愈伤组织蒜氨酸含量中的应用，所述大蒜紫色酸性磷酸酶AsPAP基因的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。本发明的大蒜紫色酸性磷酸酶AsPAP基因在大蒜叶片夹伤后表达水平显著上升。暗示其在大蒜叶片抗逆胁迫过程中可能发挥重要作用。过表达AsPAP基因的大蒜愈伤细胞的蒜氨酸含量是对照的多倍，表明大蒜紫色酸性磷酸酶AsPAP基因可以提高大蒜细胞的蒜氨酸含量，在培育高品质大蒜方面具有潜在应用价值。
📄 2021114836911
📂 C12N15_55
👤 江苏师范大学
📅 2021-12-07
柿子坊 · 知识产权运营
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