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本发明公开了一种共表达核糖体蛋白提高外源蛋白表达量的方法，属于酶工程技术领域。本发明通过在表达外源目的蛋白的同时过表达核糖体蛋白RPL10、RPL38、RPL43，显著提高了外源目的蛋白的表达量。

本发明公开了一种醛酮还原酶基因重组共表达载体、工程菌及其应用，所述重组共表达载体以质粒pET‑28b、质粒pETDuet‑1或质粒pCDFDuet‑1为基础，包含核苷酸序列为SEQ ID NO：1所示醛酮还原酶突变体基因和核苷酸序列为SEQ ID NO：3所示葡萄糖脱氢酶基因。本发明方法在双酶分开单独表达后组合催化方法的最大底物投料量50g/L(已在专利申请(201610124451.5)中公开)的基础上进一步提高到60g/L以上，同时双酶共表达体系有利于全细胞固定化，更具工业化应用前景。

一种基于共表达网络的癌症靶向标志物测绘方法，包括以下步骤：1)构建共表达基础网络，根据特征基因的基因表达数据计算邻接矩阵与拓扑矩阵；2)提取共表达基础网络的特征，即将拓扑网络的各个基因节点转换为特征向量作为网络的特征值；3)训练神经网络模型，根据游走序列，进行神经网络模型参数的训练；4)进行癌症靶向标志物测绘，根据基于密度峰的聚类中心自适应算法进行靶向基因社区的自动发现。本发明提供一种具有良好的普适性和精度，采用共表达基础网络构建和节点特征向量提取以及基因社区自动发现实现目标基因测绘的方法。

L‑泛解酸内酯脱氢酶及其突变体、共表达工程菌及应用。本发明涉及基因工程领域，具体涉及一种新的L‑泛解酸内酯脱氢酶(RhoLPLDH)及其突变体，编码基因，含有该突变体基因的重组载体以及共表达工程菌和应用。所述L‑泛解酸内酯脱氢酶氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示，编码基因如SEQ ID NO:2所示。本发明提供了高催化活性的L‑泛解酸内酯脱氢酶RhoLPLDH及其突变体，RhoLPLDH突变体与分子伴侣pGro7共表达进一步提高了目的蛋白可溶性表达。其中突变体RhoLPLDH‑V241I‑pGro7在催化100mM底物时，产物浓度随时间的推移而逐渐升高，8h内可反应完成，底物转化率大于99％，没有中间产物酮泛解酸内酯的生成。突变体RhoLPLDH‑L254I‑pGro7在催化100mM底物时，产物浓度随时间的推移而逐渐升高，8h时底物转化率达到93％，16h监测时，底物转化率大于99％。

本发明公开了一种共轭聚酮还原酶突变体，是将SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列第64或206位点进行单点突变或多点联合突变获得。共轭聚酮还原酶的突变体比酶活相较于野生型可提高25％以上。并提供了其编码基因，含有编码基因的重组载体以及共表达工程菌和应用。以该共轭聚酮还原酶其突变体与葡萄糖脱氢酶和L‑泛解酸内酯脱氢酶构建三酶共表达工程菌作为生物催化剂，催化外消旋泛解酸内酯合成光学纯D‑泛解酸内酯，提高了多酶级联反应的催化效率，降低中间产物KPL的水解损失，显著提高了DPL的收率，所得DPL产率可高达98％，光学纯度可达99.9％。

本发明公开了一种三酶共表达重组菌及其合成(S)‑香茅醛中的应用，所述重组菌是将老黄酶NemR‑PS、醇脱氢酶YsADH和葡萄糖脱氢酶BmGDHM6的编码基因共同导入宿主细胞构建而成。本发明利用共表达老黄酶NemR‑PS、醇脱氢酶YsADH和葡萄糖脱氢酶BmGDHM6的重组菌一锅法级联催化400mM(E/Z)‑柠檬醛的二步还原，反应24h补加表达葡萄糖脱氢酶BmGDHM6重组菌湿菌体，反应36h后底物完全转化为产物(S)‑香茅醇，产物e.e.值>99％，化学选择性和对映体选择性高；方法绿色高效，条件温和，操作简单，适合大规模工业生产。

本发明涉及一种简便快速定量重组杆状病毒的方法，具体而言，该方法是通过检测共表达的荧光素酶活性来定量测定重组昆虫杆状病毒滴度的方法。本发明公开了一种分泌性荧光素酶表达盒：hr5增强子‑IE1启动子‑L21‑secrNluc‑IE1终止子，其核酸序列如SEQ ID NO：1所述。本发明还同时公开了一种基于共表达分泌性荧光素酶快速滴定重组杆状病毒的方法。采用本发明的方法数分钟内就能完成测定酶活。