本发明公开了一种共表达核糖体蛋白提高外源蛋白表达量的方法，属于酶工程技术领域。本发明通过在表达外源目的蛋白的同时过表达核糖体蛋白RPL10、RPL38、RPL43，显著提高了外源目的蛋白的表达量。
📄 2017104317993
📂 C12N15_81
👤 江南大学
📅 2017-06-09
本发明公开了一种高产表面活性素的基因工程菌及其构建方法和应用，所述基因工程菌以解淀粉芽孢杆菌CPLK1314为出发菌株，敲除或者失活菌株基因组中负调控ComQ基因所得。本发明失活ComQ的基因工程菌在优化的培养基和发酵条件下用于生产表面活性素产量是野生型菌株的5倍，在5L发酵罐40‑50h可稳定生产表面活性素5‑6g/L。该表面活性素高产基因工程菌及其构建方法为加速表面活性素的产业化提供原材料，同时高产表面活性素的基因工程菌可用于制备猪腹泻病毒的防治生物试剂。
📄 202011472978X
📂 C12N1_21
👤 淮安大学, 江苏省农业科学院
📅 2020-12-15
本发明公开了一种高产杆菌霉素L的基因工程菌及其构建方法和应用，该基因工程菌以解淀粉芽孢杆菌为出发菌株，敲除或者失活菌株基因组中负调控RapF基因所得。本发明的基因工程菌株利用优化的培养基及培养条件发酵生产杆菌霉素L的产量是野生型菌株的5倍，在5L发酵罐40‑50h可稳定生产杆菌霉素L，产量达到2‑3g/L，由其发酵液制备的杆菌霉素纯品对于西瓜枯萎病原体镰刀菌孢子的萌发及菌丝的生长具有良好的抑制作用IC50为12.2μg/mL，所以本发明的高产杆菌霉素L的基因工程菌可以应用在制备防治孢子镰刀菌植物真菌性病害生物试剂中。
📄 2020114921479
📂 C12N1_21
👤 淮安大学, 江苏省农业科学院
📅 2020-12-15
本发明公开了一株高产微生物油脂红酵母基因工程菌及其构建和培养方法。本发明以一株保藏编号为CCTCC NO：M 2019503、颜色突变的红酵母U13N3为出发菌株，通过设计特定gRNA序列，利用CRISPR/Cas9基因编辑系统，实现三酰甘油脂肪酶AOX2和ATG15功能同时缺失，构建了高产微生物油脂红酵母基因工程菌。本发明的红酵母基因工程菌，以甘油为碳源，发酵120h后胞内油脂含量最高达到0.854g/g干细胞，产油脂能力强，且由于出发菌株颜色突变，所提取油脂的色素含量低，简化了后续处理工艺，适用于工业化大规模生产。
📄 2020116013191
📂 C12N1_19
👤 南京理工大学
📅 2020-12-29
本发明涉及一种7‑DHC出胞分泌合成的酿酒酵母基因工程菌株，及其构建方法和应用。本发明构建了一株可向胞外高效转运7‑DHC的重组S.cerevisiae菌株sc13，利用其进行500mL摇瓶双相发酵时，7‑DHC总产量达到28.189mg/g(分泌量11.701mg/g)，相较于对照sc1菌株，7‑DHC总产量提升14.54倍，胞外总分泌量提升13.77倍，其中胞外7‑DHC的分泌产量占比41.51％。由本发明构建的重组菌株具有更强的外分泌能力和更高的产量，对7‑DHC的合成以及简化7‑DHC的分离提取提供了指导思路，具有广阔的应用前景。
📄 2023100585156
📂 C12N1_19
👤 浙江工业大学
📅 2023-01-18
本发明涉及一种草铵膦脱氢酶突变体及其编码基因，以及利用该突变体构建的基因工程菌菌及其在催化PPO制备L‑草铵膦中的应用。所述突变体氨基酸序列如SEQ ID No.1所示，编码基因如SEQ ID No.2所示。本发明构建的基因工程菌E.coli BL21(DE3)/pETDuet‑1‑PPTGDHE3(A164G‑V354A‑R205K)‑GDH，具有高产草铵膦脱氢酶的性质，用于发酵罐生产，最高酶活力可达6605U/L，可用于微生物催化PPO制备L‑草铵膦，大大节约了成本，具有十分重要的产业价值和显著的社会效益；含草铵膦脱氢酶的固定化全细胞用于催化PPO生产L‑草铵膦，重复使用20次后，固定化细胞仍能保持100％的转化率，具有良好的工业化应用前景。
📄 2021110220135
📂 C12N9_06
👤 浙江工业大学
📅 2021-09-01
一种耐油酿酒酵母基因工程菌及其构建方法，属于生物工程技术领域。本发明公开了一株过表达Are2和Yft2基因的同时替换SEI1及Tgl1基因的酿酒酵母基因工程菌，所述酿酒酵母由原始酿酒酵母利用同源重组技术替换基因后改造而成。由于原始菌株BY4741自身存储甾醇类物质的量有限，并且过量积累的脂质中间体会产生产物抑制作用，不仅直接影响目标产物的合成，而且会引发细胞毒性，降低细胞活力。改造后的耐油酿酒酵母基因工程菌较原始出发菌株显著提升了细胞油脂存储单元脂滴结构的体积占比，有效地降低了脂质累积引起的细胞毒性和产物抑制，显著提升了酯类化合物的胞内累积量，为突破酯类类化合物酿酒酵母从头合成极限提供了新的策略以及良好的耐受细胞模型。
📄 2021113252655
📂 C12N1_19
👤 浙江工业大学
📅 2021-11-10
本发明公开了一种醛酮还原酶基因重组共表达载体、工程菌及其应用，所述重组共表达载体以质粒pET‑28b、质粒pETDuet‑1或质粒pCDFDuet‑1为基础，包含核苷酸序列为SEQ ID NO：1所示醛酮还原酶突变体基因和核苷酸序列为SEQ ID NO：3所示葡萄糖脱氢酶基因。本发明方法在双酶分开单独表达后组合催化方法的最大底物投料量50g/L(已在专利申请(201610124451.5)中公开)的基础上进一步提高到60g/L以上，同时双酶共表达体系有利于全细胞固定化，更具工业化应用前景。
📄 2017100499973
📂 C12N15_53
👤 浙江工业大学
📅 2017-01-21
本发明涉及一种羧酯酶及其编码基因，以及由该编码基因构建的基因工程，以及其在微生物催化制备S‑萘普生中的应用。所述羧酯酶氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，编码基因核苷酸核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。利用该基因构建工程菌进行酶法立体选择性催化生产S‑萘普生，具有时空产率高，效果稳定的特点，在较短时间内可以获得转化效率可达到48%以上，光学纯度可达到99%以上，对实现高产量高纯度的S‑萘普生生产具有重要意义。
📄 2022102030754
📂 C12N9_18
👤 浙江工业大学
📅 2022-03-03
本发明涉及一种羧酯酶及其编码基因，以及由该编码基因构建的基因工程，以及其在微生物催化制备S‑萘普生中的应用。所述羧酯酶氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，编码基因核苷酸核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。利用该基因构建工程菌进行酶法立体选择性催化生产S‑萘普生，具有时空产率高，效果稳定的特点，在较短时间内可以获得转化效率可达到48%以上，光学纯度可达到99%以上，对实现高产量高纯度的S‑萘普生生产具有重要意义。
📄 2022102030754
📂 C12N9_18
👤 浙江工业大学
📅 2022-03-03
本发明一种L‑半胱氨酸的基因工程菌及构建方法，以及该基因工程菌在微生物发酵制备L‑半胱氨酸中的应用。本发明通过(1)强化大肠杆菌L‑半胱氨酸合成途径的丝氨酸模块，增强大肠杆菌对丝氨酸的利用能力，(2)减弱丝氨酸的转运，减弱副产物对L‑半胱氨酸合成的影响，(3)增加硫模块合成基因的表达(4)质粒上异源表达Corynebacterium glutamicum的serC基因，得到L‑半胱氨酸高产的大肠杆菌基因工程菌株，L‑半胱氨酸产量从2.7g/L提高到3.83g/L。
📄 2019114092389
📂 C12N1_21
👤 浙江工业大学
📅 2019-12-31
本发明公开了一种草铵膦脱氢酶突变体、基因工程菌及一锅法多酶同步定向进化方法。所述草铵膦脱氢酶突变体由来源于荧光假单胞菌的草铵膦脱氢酶第164位氨基酸由丙氨酸突变为甘氨酸所得，第205位精氨酸突变为赖氨酸，第332位苏氨酸突变为丙氨酸获得的所得，氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。所述基因工程菌为将所述草铵膦脱氢酶突变体的基因导入宿主细胞。宿主细胞中还可以将葡萄糖脱氢酶的编码基因或甲酸脱氢酶的编码基因也导入，进行同步定向进化，使双基因过表达。本发明一锅法多酶同步定向进化方法可以筛选到活性大大提高的基因工程菌。本发明L‑PPT制备方法与转氨酶等催化工艺相比，工艺相对简单，原料转化率高，转化率可达100％，且立体选择性高。
📄 2020106149513
📂 C12N9_06
👤 浙江工业大学
📅 2020-06-30
柿子坊 · 知识产权运营
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