本发明公开了一种全发酵法高产L‑甲硫氨酸的方法，以产L‑甲硫氨酸重组大肠杆菌为生产菌株，在发酵至发酵液初始葡萄糖浓度低于2g/L后，采用溶氧反馈方式流加补料培养基维持溶氧值在20‑30％；当OD600达到10、30、45时分别以10‑20、20‑30、25‑40mL/h的恒定流速流加补料培养基维持溶氧值在20‑30％；当溶氧值上升至50％及以上停止流加；本发明根据细胞生长情况改变发酵过程中的补料速率，成功解决了发酵过程底物抑制、产物反馈抑制、乙酸浓度过高等问题，L‑甲硫氨酸产量从18.2g/L提升至31.71g/L，糖酸转化率提高至12.2％，同时发酵时间缩短至68h。
📄 2023102902555
📂 C12P13_12
👤 浙江工业大学
📅 2023-03-23
本发明公开了一种提高甲硫氨酸产量的方法，所述方法为：将胱硫醚‑γ‑合酶基因、同型半胱氨酸甲基转移酶基因或甲硫氨酸甲基转移酶基因中的一种或多种导入宿主菌构建重组基因工程菌，将重组基因工程菌发酵培养，获得含甲硫氨酸发酵液，发酵液分离纯化获得甲硫氨酸。本发明方法通过增加甲硫氨酸合成过程中甲基的供应和高半胱氨酸的含量，其中工程菌E.coli BL21(DE3)pBlunt‑E1‑CGS‑MMT‑HMT发酵产生甲硫氨酸的产量是0.3g/L，相对于野生型E.coli BL21(DE3)菌株，甲硫氨酸的产量增加了9倍，显著提高了反应效率。
📄 2019111034729
📂 C12P13_12
👤 浙江工业大学
📅 2019-11-13
本发明涉及高产L‑甲硫氨酸的基因工程菌及其构建方法与应用。本发明改造了大肠杆菌的L‑甲硫氨酸合成网络，通过强化大肠杆菌L‑甲硫氨酸合成途径的一碳模块中的metF和GCV，增强大肠杆菌对亚甲基四氢叶酸的利用能力；通过用来源于pTrc99A的Trc启动子置换fliY、malY的原有启动子，增强半胱氨酸/胱氨酸内运途径和半胱氨酸利用途径，解除大肠杆菌因半胱氨酸生成而产生的代谢抑制；通过敲除大肠杆菌本身的glyA和引入来源于Arthrobacter sp.FB24的glyA在质粒上过表达，解除了大肠本身丝氨酸羟甲基转移酶的限制，最后得到含有质粒的高产菌，L‑甲硫氨酸产量从2.8g/L提高到3.83g/L。
📄 2021100385184
📂 C12N1_21
👤 浙江工业大学
📅 2021-01-12
本发明提供了一种脂肪酶在拆分N‑乙酰‑DL‑甲硫氨酸甲酯中的应用，所述脂肪酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，其编码基因如SEQ ID NO.2所示。本发明脂肪酶基因可与表达载体连接构建得到含该基因的胞内表达重组质粒，再转化至大肠杆菌菌株中，获得重组大肠杆菌工程菌；该重组大肠杆菌经细胞破碎，分离纯化获得重组脂肪酶；该重组脂肪酶具有催化拆分N‑乙酰‑DL‑甲硫氨酸甲酯的能力，可以获得N‑乙酰‑L‑蛋氨酸甲酯，对映体过量值>99％和转化率达到51.2％。
📄 2019100572925
📂 C12P41_00
👤 浙江工业大学
📅 2019-01-22
本发明公开了一种无外源氨基酸作用下高产L‑甲硫氨酸的重组大肠杆菌及其应用，所述重组大肠杆菌以赖氨酸途径敲除的L‑甲硫氨酸高产菌株E.coliW3110M2/pAm为出发菌株，在基因组上对lysA基因进行原位回补，并将lysA基因的启动子替换为PfliA启动子，再在pAm的质粒上过表达gltA基因和malY基因获得的；本发明菌株在发酵过程中无需外源添加必需氨基酸也可以生长良好，降低了发酵成本，解决了发酵过程中必需氨基酸添加时机的不确定性，降低了发酵调控的操作难度，使摇瓶中L‑甲硫氨酸产量从添加赖氨酸获得的2.44g/L提高至无外源氨基酸添加时的2.96g/L。
📄 2022102444571
📂 C12N15_70
👤 浙江工业大学
📅 2022-03-14
本发明公开了一种米根霉(Rhizopus oryzae)CICC 40316在发酵制备富含S‑腺苷甲硫氨酸食品中的应用，包括以下步骤：1)往发酵基质中添加维生素B1、维生素B12、甲硫氨酸和赖氨酸，混合均匀；2)往步骤1)的混合物中接种米根霉菌种，发酵培养，获得富含S‑腺苷甲硫氨酸食品。本发明首次利用食品发酵常用菌种米根霉发酵生成SAMe，并且本发明通过在发酵原料中添加VB1、VB12、甲硫氨酸和赖氨酸，诱导米根霉发酵谷物产生高含量的SAMe，所用原料均符合食品安全国家标准，没有食品安全风险，生产的产品可直接食用，并且避免了后期提取纯化等带来的高成本、生产危害以及环境危害等风险。
📄 202310957843X
📂 A23L33_10
👤 百色学院
📅 2023-08-01
本发明涉及一种甲硫氨酸酰胺类小分子润滑油添加剂及其合成方法与应用，润滑油添加剂的结构式如下：本发明通过使用邻苯二甲酸酐、叔丁氧羰基保护的L‑甲硫氨酸和正烷基胺作为起始原料，目的产物可以分散在许多基础润滑油中，添加剂可以凝结液体石蜡、PAO10、PAO40、500SN、150BS等基础润滑油。本合成方法设计出的润滑油添加剂可有效提升润滑性能。
📄 2022100348601
📂 C07C323_59
👤 大连理工大学宁波研究院
📅 2022-01-13
本发明属于生物技术领域，涉及一种在高等植物中非钴依赖甲硫氨酸合酶的高选择性探针及其应用。本发明提供一种针对高等植物非钴依赖甲硫氨酸合成酶的高选择性探针，所述探针具有磺酰氟基，能够特异性地且共价地在赖氨酸残基处来标记蛋白。本发明可用于检测高等植物体内非钴依赖甲硫氨酸合成酶的活性，表达量以及组织和亚细胞定位。本发明的探针提供了一个靶向蛋白研究的工具，使得对不同植物类型、不同品系或不同发育时期的蛋白表达变化及蛋白网络图谱的更深层次研究得以实现。
📄 2020102570274
📂 C09K11_06
👤 常熟理工学院
📅 2020-04-03
柿子坊 · 知识产权运营
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