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摘 要:一种基于双阻遏策略增强大肠杆菌T7表达系统稳定性的方法,属于大肠杆菌表达调控领域。本发明利用基因工程技术,以细菌来源的普鲁兰酶为表达蛋白,构建了表达普鲁兰酶的重组大肠杆菌。通过使用含有lac操纵子和阻遏物基因lacI的pET表达载体pET-22b(+)和pET-28a(+),构建了重组菌E.coliBL21/pET-22b(+)-pul和E.coliBL21/pET-28a(+)-PelB- pul,利用lac操纵子严谨的双阻遏调控策略,基本消除了毒性外源蛋白的本底表达,提高了冷冻甘油菌种的表达稳定性和乳糖自诱导后的目标蛋白表达量,增强了大肠杆菌表达系统稳定性。本发明解决了大肠杆菌T7表达系统中常见的系统稳定性问题,开发了增强大肠杆菌T7表达系统稳定性的方法。
著 录 项:
专利/申请号: | CN201310505664.9 | 专利名称: | 一种基于双阻遏策略增强大肠杆菌T7表达系统稳定性的方法 |
申请日: | 2013-10-24 | 申请/专利权人 | 江南大学 |
专利类型: | 发明 | 地址: | 江苏省无锡市滨湖区蠡湖大道1800号江南大学生物工程学院 |
专利状态: | 已下证 查询审查信息 | 分类号: | C12N15/70搜分类 表 大肠杆菌搜索 |
公开/公告日: | 2015-09-23 | 转让价格: | 面议 |
公开/公告号: | CN103555751B | 交易状态: | 等待洽谈 搜索相似专利 |
交易方 | 企业 | 个人 |
买家 | 营业执照副本复印件(需盖公章) | 身份证复印件(签字) |
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卖家 | 营业执照副本复印件(需盖公章) | 身份证复印件(需申请人签字) |
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专利证原件(若授权下证) | 专利证原件(若授权下证) |
日期 | 法律信息 | 备注 |