专利名称：一种利用大肠杆菌产溶葡萄球菌酶的方法      申请号：2022102796852     转让价格：面议  收藏
法律状态：已下证   类型：发明   关键词：果蔬 球 大肠杆菌   相似专利 发布日：2024/06/20  
摘要： 本发明提供了一种利用大肠杆菌产溶葡萄球菌酶的方法，主要提供了一种溶葡萄球菌酶编码基因Opt‑Lys的核苷酸序列，如SEQ ID NO.1所示；大肠杆菌重组菌产溶葡萄球菌酶的方法，包括如下步骤将大肠杆菌重组菌接至含有氨苄青霉素以及终浓度为48‑51mM甘氨酸的LB培养基中，培养到OD600nm至0.25‑0.35后，添加终浓度为0.8‑1.1g/L的乳糖，并在36‑37℃、180‑200rpm培养35‑37h，固体分离，取上清即是溶葡萄球菌酶发酵液。在本发明中，仅通过对溶葡萄球菌酶编码基因的密码子优化，即可实现了其在大肠杆菌中的分泌表达。

专利名称：一株高产溶葡萄球菌酶的大肠杆菌突变体      申请号：2022106804932     转让价格：面议  收藏
法律状态：已下证   类型：发明   关键词：果蔬 球 大肠杆菌   相似专利 发布日：2024/06/20  
摘要： 本发明提供了一种大肠埃希氏菌(Escherichia coil)BL21/(DE3)/pOpt‑lys 4‑36，保藏日期为2022年5月23号，保藏机构为中国普通微生物菌种保藏管理中心，地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号CGMCC No.24960，本发明提供了大肠杆菌突变株，所产溶葡萄球菌酶为胞外分泌表达，且突变株的胞外溶葡萄球菌酶活性较原始菌株提高了3.1倍。

专利名称：一种通过yoaD和yoaE基因共缺失提高大肠杆菌GlmS酶活力的方法      申请号：2019113657828     转让价格：面议  收藏
法律状态：已下证   类型：发明   关键词：基因工程 L 大肠杆菌   相似专利 发布日：2024/06/20  
摘要： 本发明涉及一种通过yoaD和yoaE基因共缺失提高大肠杆菌GlmS酶活力的方法，属于基因工程技术领域。一种yoaD、yoaE表达基因通过负向调控提高重组菌的GlmS酶活力的应用，所述yoaD表达基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述yoaE表达基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明首次发现了大肠杆菌染色体上的yoaD与yoaE基因敲除后可以提高菌株表达外源GlmS酶的能力，且它们之间具有叠加增效的技术效果，这对于整个氨糖的合成途径有着重要的意义，并且敲除成功后不会留下任何抗性基因残留；两个基因的共缺失后，使得工程菌株表达外源GlmS的能力较原始菌株提高3倍左右。

专利名称：一种制备活性短肽的大肠杆菌菌株      申请号：2014106657360     转让价格：面议  收藏
法律状态：已下证   类型：发明   关键词： 大肠杆菌   相似专利 发布日：2024/04/07  
摘要： 本发明公开了一种制备活性短肽的大肠杆菌菌株，该菌株为大肠杆菌；保藏名称为大肠埃希氏菌；保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心CGMCC，保藏地址是北京市朝阳区北辰西路1号院3号；保藏日期：2014年10月24日；保藏编号：CGMCCNo.9842。本发明所述的大肠杆菌制备的大肠杆菌菌剂。本发明体内活性高、成本低的制备活性短肽的大肠杆菌菌株。

专利名称：一种固定化大肠杆菌制备胸苷的方法      申请号：2019100538888     转让价格：面议  收藏
法律状态：已下证   类型：发明   关键词： 大肠杆菌   相似专利 发布日：2024/01/23  
摘要： 本发明属于生物催化领域，具体涉及一种固定化大肠杆菌制备胸苷的方法。本发明以PVA和卡拉胶为包埋基材，活性碳为添加剂，固定产磷酸化酶的大肠杆菌，得到固定化大肠杆菌；在制备胸苷的反应中，以固定化大肠杆菌为催化剂，以磷酸盐缓冲液为溶剂，2-脱氧-α-D-核糖-1-磷酸二环己基胺盐和胸腺嘧啶为反应底物，生产胸苷。本发明采用固定化大肠杆菌制备胸苷，较好的提高了菌体对底物的耐受性，其稳定性得到提高，使得制备胸苷的收率提高；结果表明，经提纯后，胸苷纯度可达97％以上，收率达90％以上；经过6批次反应后，固定化大肠杆菌无明显活力损失。

专利名称：一种高产γ-氨基丁酸重组大肠杆菌/pET-28a-lpgad的构建方法及其应用      申请号：2011102897963     转让价格：面议  收藏
法律状态：已下证   类型：发明   关键词：PET L 氨基丁酸 大肠杆菌   相似专利 发布日：2023/10/17  
摘要： 一种高产γ-氨基丁酸重组大肠杆菌/pET-28a-lpgad的构建方法及其应用，属于发酵工程中生物技术领域。具体涉及一种构建遗传工程菌的方法、重组酶酶学性质研究及其在转化L-谷氨酸产GABA上的应用。首先，PCR扩增获得植物乳杆菌GB 01-21谷氨酸脱羧酶(GAD)基因，构建了重组质粒pET-28a-lpgad，并在E.coli BL21(DE3)成功表达，其次，粗酶液采用Ni柱亲和层析纯化获得重组GAD，并对其酶学性质进行初步研究，用于指导转化条件的优化。最终5L发酵罐上进行转化实验，GABA累积浓度可达204.5g/L，摩尔转化率为97.92％，为进一步工业化应用打下了良好的基础。

专利名称：一种以葡萄糖为底物合成生松素的大肠杆菌工程菌及其应用      申请号：2012104541638     转让价格：面议  收藏
法律状态：已下证   类型：发明   关键词：果蔬 底 大肠杆菌   相似专利 发布日：2023/10/17  
摘要： 本发明公开了一种从葡萄糖合成生松素的大肠杆菌工程菌及其应用，属于遗传工程或代谢工程领域。本发明采用合成生物学和代谢工程的手段，分别合成松素代谢中的八个基因组成的合成途径引入大肠杆菌Escherichia coli(BL21)，从而获得了一株能以葡萄糖为底物合成黄酮骨架物质生松素的重组菌，其在摇瓶中以葡萄糖为唯一底物发酵60h后，生松素的产量达到21mg/L。本发明利用合成生物学的方法，在大肠杆菌体内成功构建八基因组成的合成途径，成功实现了从葡萄糖合成生松素。为今后微生物法生产黄酮类物质提供了一定的借鉴意义。

专利名称：一种增强大肠杆菌L-苯丙氨酸胞外分泌的方法      申请号：2013100748906     转让价格：面议  收藏
法律状态：已下证   类型：发明   关键词：L 苯丙氨酸 大肠杆菌   相似专利 发布日：2023/10/17  
摘要： 本发明公开一种增强大肠杆菌L-苯丙氨酸胞外分泌的方法，是将可同时过量表达酪氨酸转氨酶TyrB、甲基紫罗碱外转运蛋白YddG、3-脱氧-D-阿拉伯庚酮糖酸-7-磷酸合成酶AroG、分支酸变位酶和预苯酸脱水酶PheA、莽草酸激酶AroK以及莽草酸脱氢酶YdiB的重组质粒转化宿主大肠杆菌，并通过液体发酵生产L-苯丙氨酸，所述重组质粒是将大肠杆菌来源的TyrB、YddG、AroG、PheA、AroK以及YdiB编码基因进行人工修饰以解除其所受代谢调控，并插入载体构建而成。本发明可明显增强大肠杆菌L-苯丙氨酸胞外分泌水平，L-苯丙氨酸产量高，有害副产物乙酸浓度低，发酵成本低廉，工艺简单，适宜产业化生产。

专利名称：一种基于双阻遏策略增强大肠杆菌T7表达系统稳定性的方法      申请号：2013105056649     转让价格：面议  收藏
法律状态：已下证   类型：发明   关键词：表 大肠杆菌   相似专利 发布日：2023/10/17  
摘要： 一种基于双阻遏策略增强大肠杆菌T7表达系统稳定性的方法，属于大肠杆菌表达调控领域。本发明利用基因工程技术，以细菌来源的普鲁兰酶为表达蛋白，构建了表达普鲁兰酶的重组大肠杆菌。通过使用含有lac操纵子和阻遏物基因lacI的pET表达载体pET-22b(+)和pET-28a(+)，构建了重组菌E.coliBL21/pET-22b(+)-pul和E.coliBL21/pET-28a(+)-PelB- pul，利用lac操纵子严谨的双阻遏调控策略，基本消除了毒性外源蛋白的本底表达，提高了冷冻甘油菌种的表达稳定性和乳糖自诱导后的目标蛋白表达量，增强了大肠杆菌表达系统稳定性。本发明解决了大肠杆菌T7表达系统中常见的系统稳定性问题，开发了增强大肠杆菌T7表达系统稳定性的方法。

专利名称：一种提高大肠杆菌对黄酮类化合物耐受性的方法      申请号：2014101698218     转让价格：面议  收藏
法律状态：已下证   类型：发明   关键词： 大肠杆菌   相似专利 发布日：2023/10/17  
摘要： 本发明公开了一种提高大肠杆菌对黄酮类化合物耐受性的方法，属于遗传工程领域。本发明通过蛋白质组学方法发现FadL表达量的增加能够缓解E.coli在黄酮类化合物存在的不利环境中的生长，也即是FadL蛋白可以提高E.coli对黄酮类化合物的耐受性，然后通过基因工程技术，将来源于E.coli BL21(DE3)的fadL基因过量表达于E.coli BL21(DE3)中，获得一株能耐受黄酮类化合物的工程菌，外源添加黄酮类化合物于E.coli生长环境中，相较于原始菌，工程菌的最大比生长速率相较于原始菌提高了2.53倍。

专利名称：一株高黄酮类化合物耐受性大肠杆菌及其构建方法和应用      申请号：2014101696424     转让价格：面议  收藏
法律状态：已下证   类型：发明   关键词： 大肠杆菌   相似专利 发布日：2023/10/17  
摘要： 本发明公开了一高黄酮类化合物耐受性大肠杆菌及其构建方法，属于遗传工程领域。本发明以可用于黄酮生产的大肠杆菌生产菌株为受体，将其malE基因进行沉默获得，能显著提高E.coli对黄酮类化合物的耐受性，外源添加黄酮类化合物刺激E.coli生长，相较于原始菌，工程菌的最大比生长速率相较于原始菌提高了2.15倍。

专利名称：一种构建高产5-氨基乙酰丙酸大肠杆菌工程菌株的方法      申请号：2014102744459     转让价格：面议  收藏
法律状态：已下证   类型：发明   关键词：氨基 大肠杆菌   相似专利 发布日：2023/10/17  
摘要： 本发明公开了一种构建高产5-氨基乙酰丙酸大肠杆菌工程菌株的方法，属于代谢工程和微生物发酵领域。本发明在使用载体pACYCDuet-1过量表达5-氨基乙酰丙酸C5合成途径关键酶谷氨酰-tRNA还原酶和谷氨醛氨基转移酶的基础上，将来源于大肠杆菌血红素生物合成途径中的尿卟啉原III合酶(uroporphyrinogen III synthase,UROS,hemD编码)及粪卟啉原III氧化酶(coproporphyrinogen III oxidase,CPO,hemF编码)，使用pCDFDuet-1单独表达或共表达两个酶基因，构建重组菌株。通过发酵验证，单独表达hemD或hemF以及共表达hemD和hemF，ALA产量均明显提高。

专利名称：一种用全局转录机制工程构建有机溶剂耐受型大肠杆菌的方法      申请号：2014102475132     转让价格：面议  收藏
法律状态：已下证   类型：发明   关键词： 大肠杆菌   相似专利 发布日：2023/10/17  
摘要： 本发明涉及一种用全局转录机制工程构建有机溶剂耐受型大肠杆菌的方法，属于生物工程技术领域。本发明包括：对全局转录因子σ70的编码基因rpoD进行随机突变构建突变文库，转化大肠杆菌进行高通量筛选，获得全局转录因子σ70的突变基因rpoDM1，携带该突变基因rpoDM1的大肠杆菌E.coliJM109/pHACMC9可耐受69%（v/v）的环己烷。本发明通过对全局转录因子σ70进行突变，显著提高了大肠杆菌对环己烷等有机溶剂的耐受性，为提高大肠杆菌等微生物菌株的有机溶剂耐受性提供了方法，为构建耐溶剂性全细胞生物催化剂提供理论依据。

专利名称：一种耐酸的大肠杆菌工程菌      申请号：2014105637389     转让价格：面议  收藏
法律状态：已下证   类型：发明   关键词： 大肠杆菌   相似专利 发布日：2023/10/17  
摘要： 本发明公开了一种耐酸的大肠杆菌工程菌，属于遗传工程领域。本发明通过蛋白质组学方法，发现secretion neighborhood ATPase可能与产酸丙酸杆菌的耐酸性相关。采用分子手段，将来源于产酸丙酸杆菌(P.acidipropionici)中编码secretion neighborhood ATPase的基因过量表达于大肠杆菌E.coli BL21(DE3)，获得一株secretion neighborhood ATPase高表达的重组菌，与对照菌株相比，对丙酸和乙酸的耐受性均有不同程度的提高。本发明的研究思路为揭示丙酸杆菌和大肠杆菌耐酸机制以及提高菌种发酵生产能力提供了依据与新思路。

专利名称：一种产γ-环糊精糖基转移酶的重组大肠杆菌及其应用      申请号：2015108964245     转让价格：面议  收藏
法律状态：已下证   类型：发明   关键词：酶 大肠杆菌   相似专利 发布日：2023/10/17  
摘要： 一种产γ‑环糊精糖基转移酶的重组大肠杆菌及其应用，本发明公开了一种优化信号肽提高γ‑环糊精糖基转移酶胞外分泌表达的方法，属于基因工程技术领域。本发明通过与γ‑环糊精糖基转移酶融合表达4种大肠杆菌胞外分泌信号肽，乳糖类似物IPTG诱导激活T7 RNA聚合酶基因的转录，在T7 RNA聚合酶作用下进行γ‑环糊精糖基转移酶的转录，从而表达重组γ‑环糊精糖基转移酶。本发明的DacD信号肽与常用的PelB信号肽相比，γ‑环糊精糖基转移酶酶活更高，解决了γ‑环糊精糖基转移酶胞外分泌量低的问题；应用本发明方法生产γ‑环糊精糖基转移酶，产量高、工艺简化、便于工业化应用。

专利名称：一种大肠杆菌高强度串联启动子及其应用      申请号：2016111265838     转让价格：面议  收藏
法律状态：已下证   类型：发明   关键词：启动 大肠杆菌   相似专利 发布日：2023/10/17  
摘要： 本发明公开了一种大肠杆菌高强度串联启动子及其应用，属于合成生物技术领域。本发明首先提供了高转录强度启动子PssrA、PdnaKJ、PgrpE、PalsRBACE和高翻译强度启动子PinfC‑rplT。然后分别将PssrA、PdnaKJ、PgrpE、PalsRBACE和PinfC‑rplT融合后得到4种具有高表达强度的串联启动子。该串联启动子的最高强度为10mM阿拉伯糖诱导的PBAD启动子的4.09倍。本发明提供的串联启动子是一种安全且高效的基因表达元件。

专利名称：一种生产5-氨基乙酰丙酸的大肠杆菌工程菌      申请号：2016110942357     转让价格：面议  收藏
法律状态：已下证   类型：发明   关键词：氨基 大肠杆菌   相似专利 发布日：2023/10/17  
摘要： 本发明公开了一种生产5-氨基乙酰丙酸的大肠杆菌工程菌，属于代谢工程和微生物发酵领域。本发明在使用载体pRSFDuet-1-hemA过量表达5-氨基乙酰丙酸C4合成途径关键酶5-氨基乙酰丙酸合酶hemA的基础上，将来源于大肠杆菌CoA合成途径中编码泛酸激酶的基因coaA、编码磷酸泛酰半胱氨酸合成酶和脱羧酶的基因dfp、编码磷酸CoA焦磷酸化酶的基因coaD，使用pUC19和pETDuet-1载体共表达三个基因，构建重组菌株。通过摇瓶培养验证，共表达CoA途径基因的重组菌ALA产量均明显提高，其中产量最高为700mg/L，相对于对照提高约46％。

专利名称：一种提高大肠杆菌中己二酸产量的方法      申请号：2017101173711     转让价格：面议  收藏
法律状态：已下证   类型：发明   关键词： 大肠杆菌   相似专利 发布日：2023/10/17  
摘要： 本发明公开了一种提高大肠杆菌中己二酸产量的方法，属于生物工程领域。本发明是以敲除了atoB基因的大肠杆菌BL21(DE3)为宿主，分模块过量表达β‑酮硫解酶基因、3‑羟酰基‑辅酶A脱氢酶基因、3‑羟基己二酰脱氢酶基因、5‑羧基‑2‑戊烯酰辅酶A还原酶基因、己二酰辅酶A，己二酸的产量可达到25.57g/L。此重组菌还可进行循环发酵，最终经过十次循环，己二酸产量累积量达18.94g/L；这对于工业上连续化的大生产有着重要作用，可以减少菌体生长时间，直接利用循环菌体发酵省时，快速，节约成本。

专利名称：一种用重组大肠杆菌生物合成胡椒醛的方法      申请号：2017108665952     转让价格：面议  收藏
法律状态：已下证   类型：发明   关键词： 大肠杆菌   相似专利 发布日：2023/10/17  
摘要： 本发明涉及一种用重组大肠杆菌生物合成胡椒醛的方法，属于生物工程技术领域。本发明主要是在大肠杆菌中导入源于假单胞菌中的一种氧化酶基因。该重组菌能催化丙烯基苯类化合物合成胡椒醛，所生成的胡椒醛浓度可达到9.15g/L。这种重组氧化酶合成胡椒醛的方法具有生产周期短，提取简单的特点，工业生产前景良好。

专利名称：一种表达赖氨酸氨肽酶的重组大肠杆菌及其构建方法      申请号：2017109427792     转让价格：面议  收藏
法律状态：已下证   类型：发明   关键词：酶 表 赖氨酸 大肠杆菌   相似专利 发布日：2023/10/17  
摘要： 本发明公开了一种表达赖氨酸氨肽酶的重组大肠杆菌及其构建方法，属于生物工程技术及基因工程领域。本发明对野生铜绿假单胞菌的氨肽酶基因进行了克隆，并首次在大肠杆菌中成功表达了重组赖氨酸氨肽酶。经过摇瓶优化后胞内最高酶活达到3.47U·mL-1，为优化前的1.37倍。利用全质粒PCR技术对赖氨酸氨肽酶编码基因的特定位点进行定向突变，通过删除位于非活性中心的PA结构域，获取热稳定性提高了约10％的突变赖氨酸氨肽酶。为进一步研究赖氨酸氨肽酶的特性、结构与功能关系等提供了基础。