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摘 要:本发明提供了一种既解除了L‑精氨酸对其的反馈抑制作用又显著提高了催化活性与热稳定性的N‑乙酰谷氨酸激酶突变体,属于生物工程领域。首先采用分子对接技术和对来源于钝齿棒杆菌CGMCC NO:0890的N‑乙酰谷氨酸激酶(CcNAGK)的结构分析,确定了E19位点对精氨酸的反馈抑制具有重要作用和位于底物结合口袋的三个关键氨基酸残基位点I74、F91与K234对酶的催化活性与热稳定性有着重大影响。然后,对其编码的氨基酸进行取代,将复合突变后基因argB4通过pDXW10引入高产精氨酸的钝齿棒杆菌中,可显著提高了钝齿棒杆菌中精氨酸的合成速率。最终在5L发酵罐中发酵96h后精氨酸产量由原来的43.2g/L提高至61.2g/L,L‑精氨酸产量提高了41.8%。
著 录 项:
专利/申请号: | CN201610979843.X | 专利名称: | 一种N-乙酰谷氨酸激酶突变体及其应用 |
申请日: | 2016-11-08 | 申请/专利权人 | 江南大学 |
专利类型: | 发明 | 地址: | 江苏省无锡市滨湖区蠡湖大道1800号 |
专利状态: | 已下证 查询审查信息 | 分类号: | C12N9/12搜分类 酶 谷氨酸搜索 |
公开/公告日: | 2019-09-10 | 转让价格: | 面议 |
公开/公告号: | CN106434594B | 交易状态: | 等待洽谈 搜索相似专利 |
交易方 | 企业 | 个人 |
买家 | 营业执照副本复印件(需盖公章) | 身份证复印件(签字) |
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卖家 | 营业执照副本复印件(需盖公章) | 身份证复印件(需申请人签字) |
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日期 | 法律信息 | 备注 |