重组人胰岛素的制备方法

摘     要：本发明涉及一种重组人胰岛素的制备方法：以pET‑SUMO为载体，将SEQ ID No.2所示的核苷酸序列插入pET‑SUMO载体的EcoRI和HindIII酶位点之间，得到重组质粒；将重组质粒转入宿主菌中，在18‑37℃下在培养基中生长至OD600＝0.5‑0.7，诱导表达后，分离出Sumo‑胰岛素原融合蛋白包涵体；用含有尿素的缓冲液洗涤Sumo‑胰岛素原融合蛋白包涵体，离心后取沉淀，变性、梯度复性后，得到复性Sumo‑胰岛素原融合蛋白；利用Sumo蛋白酶、胰蛋白酶和羧肽酶B在pH＝6.0‑8.0条件下一步酶切复性Sumo‑胰岛素原融合蛋白，酶切温度为16‑37℃，酶切时间为3‑6小时，得到重组人胰岛素。

著 录 项： 

• 1． 买家选定所需专利，确认国家手续办理方，下单，确认交易合同；
  2． 卖家确认专利可交易；
  3． 买家支付交易款项到平台；
  4． 买卖双方签订《专利转让委托书》、《转让协议》、《解除代理委托书》各一式两份并提交给办理国家手续方；
  5． 办理国家手续方提交办理官方手续，国家知识产权局1个月左右下发《著录项目变更手续合格通知书》；
  6． 买家确认收到《专利证书》、《著录项目变更手续合格通知书》；
  7． 平台把交易款项支付给卖家，至此专利转让合同完成。
  

• 交易方	企业	个人
  买家	营业执照副本复印件（需盖公章）	身份证复印件（签字）
  	专利转让委托书（需盖公章）一式两份	专利转让委托书（需签字）一式两份
  	专利转让协议（需盖公章）一式两份	专利转让协议（需签字）一式两份
  卖家	营业执照副本复印件（需盖公章）	身份证复印件（需申请人签字）
  	解除代理委托书（需盖公章）一式两份（如专利通过代理机构申请）	解除代理委托书（需签字）一式两份（如专利通过代理机构申请）
  	专利转让协议（需盖公章）一式两份	专利转让协议（需签字）一式两份
  	专利请求书或手续合格通知书、授权通知书复印件	专利请求书或手续合格通知书、专利授权通知书复印件
  	专利证原件（若授权下证）	专利证原件（若授权下证）

• 日期	法律信息	备注
  2020/07/28	授权
  2019/01/08	实质审查的生效	IPC(主分类): C12N 15/62 专利申请号: 201810938962.X 申请日: 2018.08.17
  2018/12/14	公开