本发明涉及一种转氨酶UPTA,所述转氨酶UPTA的氨基酸序列为SEQ ID NO.1。在合适温度及pH下,本发明的转氨酶UPTA对HFB1的降解率为100%;本发明转氨酶UPTA性质优良,该酶可以应用于农业、饲料和食品等工业,减少伏马毒素FB1对动物及人类健康的危害。
📄 2020110008607
📂 C12N9_10
👤 天津科技大学
📅 2020-09-22
本发明涉及一种α-转氨酶突变体及其在不对称合成L-草铵膦中的应用。所述突变体是将SEQ ID:1所示的氨基酸序列的第52、71、81、153、168、324、341和361位中的一个或者多个进行单位点突变或多位点突变获得的。本发明实现高转化率α-转氨酶突变体基因的高效表达,酶活最高为808.1U/mg。本发明中所述α-转氨酶突变体的最适反应温度最高达到67℃,在该温度下催化600mM草铵膦前体酮不对称合成L-草铵膦中,转化率高达100%,是文献报道的最高水平。该CkTA突变体解决了现有α-TA酶活低、底物耐受性差、转化率低的技术难题,具有较好应用前景。
📄 2019100321715
📂 C12N9_10
👤 浙江工业大学
📅 2019-01-14
本发明公开了一种转氨酶突变体以及其编码基因,以及其在微生物催化2‑羰基‑4‑[羟基(甲基)膦酰基]丁酸为底物不对称合成L‑草铵膦中的应用。所述转氨酶的氨基酸序列如SEQ ID:1所示,其突变体是将SEQ ID:1所示的氨基酸序列的第138和141位中的一个进行单位点突变或组合突变获得的。本发明实现了高转化率转氨酶活力突变体基因的高效表达,酶活最高可达3827U/g。本发明转氨酶突变体在温度40℃,以pH 8.0缓冲液为反应介质进行生物催化反应获得L‑草铵膦,收率高达99%,产物e.e.值达到99%,具有较好应用前景。
📄 2021105603363
📂 C12N9_10
👤 浙江工业大学
📅 2021-05-21
本发明公开了一种ω‑转氨酶突变体及其应用,所述ω‑转氨酶突变体是将SEQ ID NO.1所示野生型ω‑转氨酶氨基酸序列的第54位色氨酸、第411位精氨酸经单点或多点突变所得。相比野生型ω‑转氨酶,本发明的ω‑转氨酶突变体催化前手性酮生成手性胺的催化效率高,其中突变体R411A催化4‑(三氟甲基)苯乙酮的转化产率为野生型ω‑转氨酶的2.39倍,所得产物对映体过量值(enantiomeric excess,ee)>99.9%。
📄 2022116105949
📂 C12N9_10
👤 浙江工业大学
📅 2022-12-14
本发明提供了一种利用含转氨酶‑辅酶磷酸吡哆醛共固定化大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)工程菌细胞催化合成西他列汀手性中间体(3R)‑3‑氨基‑1‑[3‑(三氟甲基)‑5,6,7,8‑四氢‑1,2,4‑三唑并[4,3‑a]吡嗪‑7‑基]‑4‑(2,4,5‑三氟苯基)丁‑1‑酮的方法。包括含转氨酶大肠杆菌工程菌的培养、共固定化细胞的制备、固定化细胞不对称催化西他列汀手性中间体的合成。本发明方法采用转氨酶‑PLP共固定化细胞为催化剂,稳定性好,使用寿命长,有机溶剂耐受性好,可多次重复利用,并且反应过程中无需昂贵的外源辅酶添加,大幅度降低生产成本。本方法工艺简单,成本低廉,产品产率与纯度高,在西他列汀手性中间体的工业化生产中具有极高应用价值。
📄 201910434957X
📂 C12N1_21
👤 浙江工业大学
📅 2019-05-23
本发明公开了一种源自放线菌的转氨酶、突变体、重组菌及应用本发明提供的R-3-氨基丁醇的生物制备方法,初始原料为丁酮醇,价格便宜。所需的重组转氨酶可通过构建大肠杆菌基因工程菌,然后通过发酵大量制备,相对易得和廉价。所述反应为“一锅煮”式,底物和酶加入后开始反应,直接得到终产物R-3-氨基丁醇,工业成本低。本发明所提供的放线菌转氨酶突变体与野生型相比较,具有更优良的催化活性。在最优体系下,对100mM底物的转化率达90%,ee值达到99.9%;对500mM底物的转化率达到78%,ee值达到99.9%,与野生型相比较,对底物转化率分别提高了12%-25%。
📄 2018107028788
📂 C12N9_10
👤 浙江工业大学
📅 2018-06-30
本发明公开了一种转氨酶、突变体及其生产L‑草铵膦的应用,所述突变体是将SEQ ID NO:2所示氨基酸第62位的异亮氨酸取代为缬氨酸、第74位的丝氨酸取代为苏氨酸、第93位的甲硫氨酸取代为异亮氨酸、第167位的酪氨酸取代为苯丙氨酸、第220位的丙氨酸取代为脯氨酸、第282位的精氨酸取代为赖氨酸、第353位的丙氨酸取代为丝氨酸、第355的异亮氨酸取代为缬氨酸。转氨酶以4‑(甲基羟基磷酰基)‑2‑羰基‑丁酸为底物制备L‑草铵膦,产物ee>99.9%,4h底物转化率为56.31%。转氨酶突变体产物ee>99.9%,4h底物转化率为95.42%。
📄 2018105409802
📂 C12N9_10
👤 浙江工业大学
📅 2018-05-30
本发明涉及一种重组R‑ω‑转氨酶及突变体,以及其在不对称合成西他列汀中的应用。本发明筛选新型R‑ω‑转氨酶,并与现有的高效转氨酶重组,获得的重组体的氨基酸序列如SEQ ID:15所示,其突变体是将SEQ ID:15所示的氨基酸序列的第71、135、或292中的一个或者多个进行单位点突变或多位点突变获得的,最佳的R‑ω‑转氨酶突变株的氨基酸序列如SEQ ID:17所示,对应的核苷酸序列如SEQ ID:18所示。本发明提供了具有更高活性(582.4U/g)和立体选择性(e.e.值99.9%)的R‑ω‑TA突变体,可催化500mM底物转化为西他列汀,转化率高达99%,对于提升西他列汀生物催化制备技术具有重要意义。
📄 2019113093505
📂 C12N9_10
👤 浙江工业大学
📅 2019-12-18
本发明公开了一种转氨酶与乙醇脱氢酶偶联合成(R)‑1‑[3,5‑双(三氟甲基)苯基]乙胺的方法,以R‑ω‑转氨酶和乙醇脱氢酶为双酶催化剂,以3,5‑双三氟甲基苯乙酮为氨基受体,以异丙胺盐酸盐为胺供体,以磷酸吡哆醛和NAD+为辅助因子,加入助溶剂,以pH6‑10的缓冲液为反应介质构成反应体系,在30‑50℃、150‑200rpm搅拌反应,获得(R)‑1‑[3,5‑双(三氟甲基)苯基]乙胺;本发明在底物浓度为166mM时,产率由82.96%提高到99.9%,显著提高了底物BPO的胺化效率,从而建立高效胺化BPO制备R‑BPA的工艺,为后期的工业应用提供了参考。
📄 2021114856277
📂 C12P13_00
👤 浙江工业大学
📅 2021-12-07
本发明涉及以环氧树脂为载体,将含有转氨酶与辅酶磷酸吡哆醛(简称PLP)一起共价固定化的获得的转氨酶-PLP共固定化酶及其制备方法,以及该共固定化转氨酶在制备西他列汀药物手性中间体中的应用。本发明采用转氨酶-PLP共固定化酶为催化剂,稳定性好,使用寿命长,有机溶剂耐受性好,可多次重复利用,并且反应过程中无需昂贵的外源辅酶添加,大幅度降低生产成本。本方法工艺简单,成本低廉,产品产率与纯度高,在西他列汀手性中间体的工业化生产中具有极高应用价值。
📄 2019100757372
📂 C12N15_54
👤 浙江工业大学
📅 2019-01-25
本发明公开了一种新型转氨酶及其高活力突变体在制备L-草铵膦中的应用,转氨酶的氨基酸序列如SEQ ID:5所示,其突变体是将SEQ ID:5所示的氨基酸序列的第124、144、237、250、和328位中的一个或者多个进行单位点突变或多位点突变获得的。本发明实现高转化率转氨酶活力突变体基因的高效表达,酶活最高为840U/mg。本发明中所述转氨酶突变体的最适反应温度最高达到67℃,在该温度下催化800mM草铵膦前体酮利用无机胺正丁胺不对称合成L-草铵膦中,转化率高达100%。该AcTA突变体解决了当前转氨酶制备L-草铵膦工艺中,酶源少、酶活低、底物耐受性和氨基供体昂贵等技术难题,具有较好应用前景。
📄 2019100334749
📂 C12N9_10
👤 浙江工业大学
📅 2019-01-14
本发明公开了一种D‑转氨酶突变体及在制备L‑草铵膦中的应用,所述D‑转氨酶突变体是将SEQ ID NO.1所示氨基酸序列第265位色氨酸突变为丝氨酸。本发明D‑转氨酶突变体具有高对映选择性(ee>99.9%),仅仅催化D‑草铵膦转化为4‑(羟基(甲基)磷酰基)‑2‑氧代丁酸,L‑草铵膦得以保留,降低了反应难度。采用一锅法,以市售的D,L‑草铵膦为底物,将无除草活力的D‑草铵膦合成L‑草铵膦,具有更高的原子利用效率,符合绿色化学的要求。操作简单,在温和的反应条件下进行,适合大规模生产,具有工业化应用的潜力,L‑草铵膦产物的产率高达100%,对映体过量(ee)大于99.9%。
📄 2022116106227
📂 C12N9_10
👤 浙江工业大学
📅 2022-12-14