本发明涉及一种α-转氨酶突变体及其在不对称合成L-草铵膦中的应用。所述突变体是将SEQ ID:1所示的氨基酸序列的第52、71、81、153、168、324、341和361位中的一个或者多个进行单位点突变或多位点突变获得的。本发明实现高转化率α-转氨酶突变体基因的高效表达，酶活最高为808.1U/mg。本发明中所述α-转氨酶突变体的最适反应温度最高达到67℃，在该温度下催化600mM草铵膦前体酮不对称合成L-草铵膦中，转化率高达100％，是文献报道的最高水平。该CkTA突变体解决了现有α-TA酶活低、底物耐受性差、转化率低的技术难题，具有较好应用前景。
📄 2019100321715
📂 C12N9_10
👤 浙江工业大学
📅 2019-01-14
本发明公开了一种转氨酶突变体以及其编码基因，以及其在微生物催化2‑羰基‑4‑[羟基(甲基)膦酰基]丁酸为底物不对称合成L‑草铵膦中的应用。所述转氨酶的氨基酸序列如SEQ ID:1所示，其突变体是将SEQ ID:1所示的氨基酸序列的第138和141位中的一个进行单位点突变或组合突变获得的。本发明实现了高转化率转氨酶活力突变体基因的高效表达，酶活最高可达3827U/g。本发明转氨酶突变体在温度40℃，以pH 8.0缓冲液为反应介质进行生物催化反应获得L‑草铵膦，收率高达99％，产物e.e.值达到99％，具有较好应用前景。
📄 2021105603363
📂 C12N9_10
👤 浙江工业大学
📅 2021-05-21
本发明公开了一种催化不对称合成手性β‑炔基‑β‑氨基酮衍生物的方法，它以式(3)所示的手性联萘酚衍生物为催化剂，在有机溶剂、催化剂及添加剂存在下，式(2)所示的炔基氟硼酸钾盐对式(1)所示的氮杂烯酮类化合物进行不对称1,4‑加成反应，生成如式(4)所示的含有一个手性中心的β‑炔基‑β‑氨基酮衍生物，反应式如下：本发明利用一种新型多氟联萘酚骨架的催化剂，并采用官能团兼容性好、性质稳定的炔基氟硼酸钾盐作为亲核试剂，在多种添加剂的作用下，高效制备了多种手性β‑炔基‑β‑氨基酮衍生物。本发明底物适用范围广，反应条件简单温和，所得高光学活性的产物可进一步转化为多种非天然的手性β‑氨基酸衍生物，具有较高的科学研究及实际应用价值。
📄 2020100263939
📂 C07D209_48
👤 浙江工业大学
📅 2020-01-10
本发明公开了一种羰基还原酶突变体及其不对称合成双手性化合物的应用，所述突变体是将SEQ ID NO.1所示野生型羰基还原酶KmCR‑WT氨基酸序列第100位进行单突变获得的。本发明突变体A100S活力较野生型提高了0.8倍，且具有严格的S‑构型立体选择性。对其他本发明所述的脂肪族酮化合物，催化活力均有提升，其中对异丁酰乙酸乙酯、丁酰乙酸乙酯的酶活高于目前报道的文献水平。
📄 2021107820798
📂 C12N9_04
👤 浙江工业大学
📅 2021-07-09
本发明公开了一种金鸡纳碱骨架的金刚烷基膦配体、含有此类配体的银催化剂以及应用，所述配体具有如式(I)的结构或其互变异构体、对映异构体、非对映异构体：式(I)中，R1为乙烷基或乙烯基；取代基R2为甲氧基或氢原子。本发明的金鸡纳碱骨架的金刚烷基膦配体与银盐组成的新型催化剂，可高效催化芳香醛与异氰基乙酸酯的不对称[3+2]环加成反应，高立体选择性和高收率地获得相应的手性噁唑啉中间体；该技术可应用于氟苯尼考中间体、氯霉素中间体的不对称合成中，具有合成路线短、收率高、立体选择性好等优点，具有较好的经济和社会效益。
📄 2024116259876
📂 C07F9_6561
👤 浙江工业大学
📅 2024-11-14
本发明提供了一种如式(I)所示的手性吡唑螺呋喃类化合物的不对称合成方法，所述的合成方法按如下步骤进行：将式(II)所示1,3‑环己二酮类化合物和式(III)所示吡唑烯酮类化合物、手性方酸催化剂、有机溶剂A混合，在‑20～60℃下反应0.1～48h，得到式(IV)所示的化合物，向式(IV)所示化合物中加入碘源添加剂、碱性物质和有机溶剂B，在‑20～60℃下反应0.1～48h，反应液经后处理得到式(I)所示的手性吡唑螺呋喃类化合物；本发明反应条件温和，产物收率高、选择性优异；制备的手性吡唑螺呋喃类化合物具有手征性，核心骨架结构具有新颖性。
📄 2017100535861
📂 C07D491_107
👤 浙江工业大学
📅 2017-01-22
本发明涉及一种重组R‑ω‑转氨酶及突变体，以及其在不对称合成西他列汀中的应用。本发明筛选新型R‑ω‑转氨酶，并与现有的高效转氨酶重组，获得的重组体的氨基酸序列如SEQ ID:15所示，其突变体是将SEQ ID:15所示的氨基酸序列的第71、135、或292中的一个或者多个进行单位点突变或多位点突变获得的，最佳的R‑ω‑转氨酶突变株的氨基酸序列如SEQ ID:17所示，对应的核苷酸序列如SEQ ID:18所示。本发明提供了具有更高活性(582.4U/g)和立体选择性(e.e.值99.9％)的R‑ω‑TA突变体，可催化500mM底物转化为西他列汀，转化率高达99％，对于提升西他列汀生物催化制备技术具有重要意义。
📄 2019113093505
📂 C12N9_10
👤 浙江工业大学
📅 2019-12-18
本发明涉及一种来源于放射农杆菌的卤醇脱卤酶突变体，以及其在制备(S)‑环氧氯丙烷中的应用。所述突变的位点为第85位。通过卤醇脱卤酶进行改造获得突变体，对手性环氧氯丙烷的不对称合成具有高立体选择性与活性，在磷酸盐缓冲体系中，以1,3‑二氯‑2‑丙醇为底物，能够获得光学纯度(e.e.值)大于99％的(S)‑ECH，产率达87％以上，具有极高的应用价值。
📄 2018115853537
📂 C12N9_88
👤 浙江工业大学
📅 2018-12-24
本发明公开了一种新型转氨酶及其高活力突变体在制备L-草铵膦中的应用，转氨酶的氨基酸序列如SEQ ID:5所示，其突变体是将SEQ ID:5所示的氨基酸序列的第124、144、237、250、和328位中的一个或者多个进行单位点突变或多位点突变获得的。本发明实现高转化率转氨酶活力突变体基因的高效表达，酶活最高为840U/mg。本发明中所述转氨酶突变体的最适反应温度最高达到67℃，在该温度下催化800mM草铵膦前体酮利用无机胺正丁胺不对称合成L-草铵膦中，转化率高达100％。该AcTA突变体解决了当前转氨酶制备L-草铵膦工艺中，酶源少、酶活低、底物耐受性和氨基供体昂贵等技术难题，具有较好应用前景。
📄 2019100334749
📂 C12N9_10
👤 浙江工业大学
📅 2019-01-14
本发明公开了一种如式(III)所示的手性α-硫氰基环状酮酸酯类化合物的合成方法：以式(I)所示的环状酮酸酯类化合物和式(II)所示的N-硫氰基酞酰亚胺为原料，于手性催化剂的作用下，在有机溶剂中进行不对称硫氰基化反应直至反应完全，反应结束后反应液经后处理得到相应的产物，即式(III)所示手性α-硫氰基环状酮酸酯类化合物，这类化合物可以作为一类重要的有机生物活性中间体应用于医药、农药等领域。本发明提供的这种手性α-硫氰基环状酮酸酯类化合物高效合成方法，其收率高、对映选择性好、反应底物范围广泛、反应试剂廉价易得，具有重要的应用价值。
📄 2019104731511
📂 C07C331_14
👤 浙江工业大学
📅 2019-05-31
本发明公开了一种草铵膦脱氢酶突变体、工程菌、固定化细胞及应用，所述突变体是将SEQ ID No.2所示草铵膦脱氢酶氨基酸序列的第145位、第384位、第348位、第292位、第202位、第70位、第78位进行单突变或多突变获得的。本发明草铵膦脱氢酶突变体与甲酸脱氢酶共表达工程菌的固定化细胞，以2‑羰基‑4‑(羟基甲基膦酰基)‑丁酸底物催化还原为L‑草铵膦，实现不对称合成L‑草铵膦，无需昂贵的化学拆分试剂，提高其热稳定性和操作稳定性，实现重复使用。固定化细胞酶活为162.5U/g，酶活回收率为78.1％，可以通过过滤回收，并可重复使用20批次以上保持100％转化率，极大降低了生产成本。
📄 2021116466637
📂 C12N9_06
👤 浙江工业大学
📅 2021-12-30
本发明涉及一种新型转氨酶及其高活力突变体在不对称合成L-草铵膦中的应用。所述转氨酶的氨基酸序列如SEQ ID:1所示，其突变体是将SEQ ID:1所示的氨基酸序列的第87、108、167、304和357位中的一个或者多个进行单位点突变或多位点突变获得的。本发明实现高转化率转氨酶活力突变体基因的高效表达，酶活最高为818.4U/mg。本发明中所述转氨酶活力突变体的最适反应温度最高达到67℃，在该温度下催化800mM草铵膦前体酮不对称合成L-草铵膦中，转化率高达100％，是文献报道的最高水平。该NsTA突变体解决了当前转氨酶制备L-草铵膦工艺中，酶源少、酶活低、底物耐受性和转化率低等技术难题，具有较好应用前景。
📄 2019100321537
📂 C12N9_10
👤 浙江工业大学
📅 2019-01-14
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