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本发明公开一种马铃薯晚疫病恒温分子检测标记引物及检测方法，所述分子标记引物包括序列表SEQ ID NO：1～3所示的上游引物RAA‑Pi1F、下游引物RAA‑Pi1R和Pi‑Probe探针。发明设计的RAA扩增引物与探针经与NCBI的核酸序列数据库进行比对，确定具有物种特异性。本发明检测方法的灵敏度高，扩增时间为20min时，RAA‑LFD的最低检测下限为1×10‑3fg/μL；扩增时间为25min时，RAA‑LFD的最低检测下限为1×10‑4fg/μL，换算成模板分子拷贝数为27.4copies/mL。

本发明公开一种分子标记引物及马铃薯晚疫病鉴定方法，分子标记引物用于鉴定马铃薯晚疫病致病疫霉，所述分子标记如序列表SEQ ID NO：1～6所示。鉴定方法包括如下步骤：提取待测材料组织DNA；使用所示分子标记引物进行PCR扩增；PCR扩增产物用1.5％的琼脂糖凝胶电泳检测。本发明提供的三对引物仅在致病疫霉DNA为模板时能获得阳性扩增条带，扩增产物经测序分析与预期序列的相似度分别为94.96％、97.71％、96.44％，而在以辣椒疫霉等近缘种的基因组DNA为模板时均无克隆条带，引物特异性好，能有效区分近缘种。本发明方法可以检测到没有任何病斑、但是已经染菌的叶片，这对病害防控相当重要。