一种基于TdT和DNAzyme扩增的黄瓜绿斑驳病毒可视化检测方法

摘     要：本发明公开了一种基于TdT和DNAzyme扩增的黄瓜绿斑驳病毒可视化检测方法，带有部分CGMMV序列的T1和带有Mg2+‑依赖的DNAzyme的部分酶序列的P1杂交，AcⅡ识别其底物序列5′‑AACGTT‑3′，后者被剪切成两部分，随后解链为4个ssDNA片段，加入脱氧核苷酸末端转移酶(TdT)及dCTP，进行加尾反应，生成Mg2+‑依赖的DNAzyme的完整酶序列。然后再加入HP，HP的环部位与Mg2+‑依赖的DNAzyme的酶序列进行杂交，在Mg2+存在下，Mg2+‑依赖的DNAzyme酶序列剪切其识别位点，将HP的茎环结构剪切为两部分，位于茎部位的G‑四连体结构被释放，在K+存在下，结合Hemin形成Hemin/G‑四连体结构，在H2O2存在下，催化ABTS2‑氧化，使溶液变绿。溶液吸光度与CGMMV浓度呈正相关。

著 录 项： 

• 1． 买家选定所需专利，确认国家手续办理方，下单，确认交易合同；
  2． 卖家确认专利可交易；
  3． 买家支付交易款项到平台；
  4． 买卖双方签订《专利转让委托书》、《转让协议》、《解除代理委托书》各一式两份并提交给办理国家手续方；
  5． 办理国家手续方提交办理官方手续，国家知识产权局1个月左右下发《著录项目变更手续合格通知书》；
  6． 买家确认收到《专利证书》、《著录项目变更手续合格通知书》；
  7． 平台把交易款项支付给卖家，至此专利转让合同完成。
  

• 交易方	企业	个人
  买家	营业执照副本复印件（需盖公章）	身份证复印件（签字）
  	专利转让委托书（需盖公章）一式两份	专利转让委托书（需签字）一式两份
  	专利转让协议（需盖公章）一式两份	专利转让协议（需签字）一式两份
  卖家	营业执照副本复印件（需盖公章）	身份证复印件（需申请人签字）
  	解除代理委托书（需盖公章）一式两份（如专利通过代理机构申请）	解除代理委托书（需签字）一式两份（如专利通过代理机构申请）
  	专利转让协议（需盖公章）一式两份	专利转让协议（需签字）一式两份
  	专利请求书或手续合格通知书、授权通知书复印件	专利请求书或手续合格通知书、专利授权通知书复印件
  	专利证原件（若授权下证）	专利证原件（若授权下证）

• 日期	法律信息	备注
  2021/09/24	授权
  2019/02/12	实质审查的生效	IPC(主分类): C12Q 1/70 专利申请号: 201811029387.8 申请日: 2018.09.05
  2019/01/11	公开