利用原生质体转化构建黑根霉CPR基因工程菌的方法

摘     要：本发明提供了一种利用原生质体转化技术对黑根霉（Rhizopus nigericans）进行外源基因的遗传转化方法：利用真菌细胞壁降解酶对黑根霉（Rhizopus nigericans）的细胞壁进行处理，得到原生质体并进行纯化，以潮霉素B作为选择标记，首次将来自米根霉NADPH-细胞色素P450还原酶CYPOR（缩写：CPR基因）基因采用原生质体转化方法导入黑根霉中，获得工程菌。本发明的有益效果体现在：可以用于黑根霉的分子生物学研究，如研究该菌P450酶系基因对甾体化合物羟化作用的分子机制等；可以用来对黑根霉实施基因工程从而进行遗传改良育种，提高黑根霉对甾体底物羟化转化率。

著 录 项： 

• 1． 买家选定所需专利，确认国家手续办理方，下单，确认交易合同；
  2． 卖家确认专利可交易；
  3． 买家支付交易款项到平台；
  4． 买卖双方签订《专利转让委托书》、《转让协议》、《解除代理委托书》各一式两份并提交给办理国家手续方；
  5． 办理国家手续方提交办理官方手续，国家知识产权局1个月左右下发《著录项目变更手续合格通知书》；
  6． 买家确认收到《专利证书》、《著录项目变更手续合格通知书》；
  7． 平台把交易款项支付给卖家，至此专利转让合同完成。
  

• 交易方	企业	个人
  买家	营业执照副本复印件（需盖公章）	身份证复印件（签字）
  	专利转让委托书（需盖公章）一式两份	专利转让委托书（需签字）一式两份
  	专利转让协议（需盖公章）一式两份	专利转让协议（需签字）一式两份
  卖家	营业执照副本复印件（需盖公章）	身份证复印件（需申请人签字）
  	解除代理委托书（需盖公章）一式两份（如专利通过代理机构申请）	解除代理委托书（需签字）一式两份（如专利通过代理机构申请）
  	专利转让协议（需盖公章）一式两份	专利转让协议（需签字）一式两份
  	专利请求书或手续合格通知书、授权通知书复印件	专利请求书或手续合格通知书、专利授权通知书复印件
  	专利证原件（若授权下证）	专利证原件（若授权下证）

• 日期	法律信息	备注
  2016/04/13	授权
  2014/04/30	实质审查的生效	IPC(主分类): C12N 15/80 专利申请号: 201310316876.2 申请日: 2013.07.24
  2014/04/02	公开