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24小时咨询热线摘 要：本发明公开了一种植物双靶点CRISPR/Cas9载体及其构建方法和应用，首先得到串联两个sgRNA表达框的中间载体；然后得到pBI121‑MCS‑Cas9；再设计包含两条sgRNA的引物，以所述中间载体为模板进行PCR；最后通过同源重组把PCR产物连入pBI121‑MCS‑Cas9中。通过上述制备方法可制备得到所述植物双靶点CRISPR/Cas9载体，以pBI121载体为骨架载体，依次连接有sgRNA表达框1、sgRNA表达框2和Cas9表达框。本发明的方法提高了双靶点CRISPR/Cas9载体构建的效率，获得所述中间载体和所述pBI121‑MCS‑Cas9载体后，仅需设计一对引物进行一步PCR和一步同源重组即可成功构建双靶点CRISPR/Cas9载体，方便快捷。另外，本发明一次反应仅需20元，只需合成带接头的一对引物，不需额外的引物及其他试剂，显著降低了成本。
著 录 项：
| 专利/申请号： | CN202110770783.1 | 专利名称： | 一种植物双靶点CRISPR/Cas9载体及其构建方法和应用 |
| 申请日： | 2021-07-07 | 申请/专利权人 | 荆楚理工学院 |
| 专利类型： | 发明 | 地址： | 湖北省荆门市东宝区象山大道33号 |
| 专利状态： | 已下证 查询审查信息 | 分类号： | C12N15/82搜分类 农业种植 C R P 港口 载体搜索 |
| 公开/公告日： | 转让价格： | 面议 | |
| 公开/公告号： | 交易状态： | 等待洽谈 搜索相似专利 |
| 交易方 | 企业 | 个人 |
| 买家 | 营业执照副本复印件（需盖公章） | 身份证复印件（签字） |
| 专利转让委托书（需盖公章）一式两份 | 专利转让委托书（需签字）一式两份 | |
| 专利转让协议（需盖公章）一式两份 | 专利转让协议（需签字）一式两份 | |
| 卖家 | 营业执照副本复印件（需盖公章） | 身份证复印件（需申请人签字） |
| 解除代理委托书（需盖公章）一式两份（如专利通过代理机构申请） | 解除代理委托书（需签字）一式两份（如专利通过代理机构申请） | |
| 专利转让协议（需盖公章）一式两份 | 专利转让协议（需签字）一式两份 | |
| 专利请求书或手续合格通知书、授权通知书复印件 | 专利请求书或手续合格通知书、专利授权通知书复印件 | |
| 专利证原件（若授权下证） | 专利证原件（若授权下证） |
| 日期 | 法律信息 | 备注 |
| 2023/09/12 | 专利权的转移 | 登记生效日: 2023.08.28 专利权人由荆楚理工学院变更为荆门辰龙生态农业科技有限公司 地址由448000 湖北省荆门市东宝区象山大道33号变更为448000 湖北省荆门市东宝区牌楼镇来龙村村委会办公室二楼201号 |
| 2023/08/22 | 专利实施许可合同备案的注销 | 合同备案号: X2023420000094 让与人: 荆楚理工学院 受让人: 飞乐新材料科技（山东）有限责任公司 解除日: 2023.08.07 |
| 2023/05/23 | 专利实施许可合同备案的生效 | IPC(主分类): C12N 15/82 合同备案号: X2023420000094 专利申请号: 202110770783.1 申请日: 2021.07.07 让与人: 荆楚理工学院 受让人: 飞乐新材料科技（山东）有限责任公司 发明名称: 一种植物双靶点CRISPR/Cas9载体及其构建方法和应用 申请公布日: 2021.09.14 授权公告日: 2022.08.19 许可种类: 普通许可 备案日期: 2023.05.06 |
| 2022/08/19 | 授权 | |
| 2021/10/01 | 实质审查的生效 | IPC(主分类): C12N 15/82 专利申请号: 202110770783.1 申请日: 2021.07.07 |
| 2021/09/14 | 公开 |
