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摘 要:本发明公开了一种下调真核基因表达的方法及其试剂盒,采用5’‑磷酸化单链寡聚脱氧核糖核苷酸(5’‑p‑ss‑DNA Oligo)和Argonaute mRNA联合下调基因表达,包括NgAgo基因的改造,表达质粒的构建,表达质粒经过线性化、体外转录、回收步骤获得Argonaute mRNA,根据目的基因序列设计并合成5’‑p‑ss‑DNA Oligo,将Argonaute mRNA和5’‑p‑ss‑DNA Oligo导入靶细胞中等步骤;本发明所述的方法中改造的NgAgo基因能够在靶细胞中快速高效的进入细胞核;5’‑p‑ss‑DNA Oligo序列依据目的基因设计,对靶序列识别具有良好的特异性;5’‑p‑ss‑DNA Oligo/NgAgo系统通过对真核细胞DNA水平的抑制作用,能够稳定高效的下调目的基因表达;5’‑p‑ss‑DNA Oligo具有良好的稳定性,利于在细胞内发挥作用;真核细胞自然条件下不存在内源性的5’‑p‑ss‑DNA Oligo因此特异性高。
著 录 项:
专利/申请号: | CN201610945971.2 | 专利名称: | 一种下调真核基因表达的方法及其试剂盒 |
申请日: | 2016-11-02 | 申请/专利权人 | 南通大学 |
专利类型: | 发明 | 地址: | 江苏省南通市崇川区啬园路9号 |
专利状态: | 已下证 查询审查信息 | 分类号: | C12N15/89搜分类 生物技术搜索 |
公开/公告日: | 2020-04-07 | 转让价格: | 面议 |
公开/公告号: | CN106566844B | 交易状态: | 等待洽谈 搜索相似专利 |
交易方 | 企业 | 个人 |
买家 | 营业执照副本复印件(需盖公章) | 身份证复印件(签字) |
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卖家 | 营业执照副本复印件(需盖公章) | 身份证复印件(需申请人签字) |
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专利证原件(若授权下证) | 专利证原件(若授权下证) |
日期 | 法律信息 | 备注 |