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摘 要:一种快速测定囊泡病毒滴度的绝对定量PCR方法,是将含囊泡病毒的待测样品超声破碎,然后稀释、过滤,用其感染对数生长期细胞1h,收集细胞悬液、计算细胞数量,提取总DNA;对上述DNA进行qPCR检测,以含有该片段的pGEM‑T载体为标准品,绘制绝对定量PCR检测的标准曲线。根据样品的Ct值计算出每样品中含有的病毒基因组拷贝数。根据感染复数公式,计算感染每个细胞的平均病毒粒子数量,即感染时病毒与细胞数量的比值计算病毒滴度。本方法测定囊泡病毒滴度,当样品浓度为1×102~1×1011病毒基因拷贝/mL时检测时间仅需4‑6h,耗时短,与传统的病毒滴度检测方法相比,操作简单快捷,准确,极大提高了囊泡病毒滴度的检测效率,特别适用于囊泡病毒滴度的快速测定。
著 录 项:
专利/申请号: | CN202010064413.1 | 专利名称: | 一种快速测定囊泡病毒滴度的绝对定量PCR方法 |
申请日: | 2020-01-20 | 申请/专利权人 | 湖南农业大学 |
专利类型: | 发明 | 地址: | 湖南省长沙市芙蓉区农大路1号 |
专利状态: | 已下证 查询审查信息 | 分类号: | C12Q1/70搜分类 病毒 C R P 港口 定量搜索 |
公开/公告日: | 2022-09-30 | 转让价格: | 面议 |
公开/公告号: | CN111235309B | 交易状态: | 等待洽谈 搜索相似专利 |
交易方 | 企业 | 个人 |
买家 | 营业执照副本复印件(需盖公章) | 身份证复印件(签字) |
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卖家 | 营业执照副本复印件(需盖公章) | 身份证复印件(需申请人签字) |
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日期 | 法律信息 | 备注 |