本发明公开了一种免标记比率荧光型检测抗原方法。本发明包括以下步骤：设计一条单链DNA，包含对CRISPR的识别DNA序列，目标抗原的适配体，两者通过数个连续的T碱基间隔，构建出组分A；以目标抗原作为靶标，在96孔板上修饰目标抗原的抗体，构建出组分B；将表面羧基化的二氧化硅微球与末端修饰有氨基的DNA链相连，辅助DNA与有氨基的DNA互补配对形成双链，构建出组分C；将待检测物中加入组分A、组分B、组分C、铜离子和抗坏血酸、DAPI染料、核酸外切酶III；检测待检测物的红色荧光和蓝色荧光，以比率荧光法进行目标抗原检测。本发明比率荧光法比较两种荧光的强度作为信号参数，更准确、灵敏度更高、选择性更好；且提高了灵敏度、克服了传统方法需要标记抗体的缺点，节约了检测成本。
📄 2022102816004
📂 G01N33_68
👤 西南大学
📅 2022-03-22
本发明属于生物检测领域，具体涉及一种用于外泌体CD82蛋白含量检测的试剂盒。所述试剂盒包括标准品、包被CA1抗体的酶标板、HRP标记的CA2抗体工作液、缓冲液、显色液、反应终止液。本发明提供的试剂盒可特异性检测血液外泌体中CD82蛋白含量，作为高表达CD82蛋白含量胃癌辅助诊断手段，具有检测方法简便、准确性强、稳定性良好等优点，具有良好的应用前景。
📄 2025111392264
📂 G01N33_68
👤 北京国浩宇医疗科技有限公司
📅 2025-08-14
本发明公开了一种区分蚕丝种类的检测方法,利用不同特征多肽制备蚕丝素蛋白特异抗体来在间接酶联免疫的方法中检测不同种类蚕丝的丝素蛋白成分，即将蚕丝素蛋白洗脱液包被到酶标板上，然后添加兔抗丝素蛋白抗体与抗原结合形成抗原抗体复合物。洗涤后加入碱性磷酸酯酶标山羊抗兔IgG(H+L)抗体，形成抗体‑抗原‑抗体复合物，洗涤加入TMB显色液，底物被酶催化为有色产物，根据产物颜色变化的深浅进行定性分析。该方法操作简单，灵敏度高，优于常规检测方法。
📄 2015107694906
📂 G01N33_68
👤 浙江理工大学
📅 2015-11-12
一种基于测定p38MAPK蛋白表达以检测斑马鱼M3受体蛋白的方法，包括以下步骤：(1)斑马鱼脑部组织蛋白样品的制备；(2)SDS凝胶电泳；(3)转膜；(4)封闭；(5)一抗、二抗孵育；(6)显色反应；(7)计算M3受体变化结果。本发明克服了传统斑马鱼M3受体检测受制于无针对性抗体而无法使用蛋白质免疫印迹技术之缺陷，首次提出使用p38MAPK磷酸化水平从而测定斑马鱼M3受体蛋白含量变化，该方法灵敏度高、稳定性好、不需要复杂设备；同时本发明操作简单快捷、特异性高、成本低，本发明从分子方面研究胆碱能系统的内在作用机制，再结合斑马鱼行为变化方面的研究，最终能够实现对水质的实时在线评估与监测。
📄 201610368638X
📂 G01N33_68
👤 山东师范大学
📅 2016-05-27
本发明涉及蚕丝领域，公开了一种分析桑蚕丝丝素蛋白中氨基酸径向分布的方法。本发明先采用碱法脱胶对桑蚕丝和进行脱胶处理，得到丝素纤维，对丝素纤维进行分组，然后分步采用不同蛋白酶对丝素纤维由外及内依次进行酶解，最后利用氨基酸分析对水解程度不同的残余丝素中各种氨基酸的含量进行测定，可以得到各氨基酸在桑蚕丝中的径向分布。本发明根据桑蚕丝丝素纤维径向上氨基酸分布的特点，采用多次酶解法对丝素蛋白进行溶解，特异性高，作用条件温和，对氨基酸的破坏小，使结果更准确。
📄 2017105994515
📂 G01N33_68
👤 浙江理工大学
📅 2017-07-21
本发明公开了BVDV E2多表位融合肽及其制备方法，即基因合成优选出的BVDV-1和BVDV-2的E2蛋白的各2个抗原表位串联序列，并将序列克隆到pET-28a(+)载体，转化大肠杆菌DH-5α，将正确的重组载体转化大肠杆菌BL21，经IPTG诱导表达，Ni-NTA纯化，即得BVDV E2多表位融合肽。动物免疫E2抗原多表位融合肽后，能产生BVDV的中和抗体，可用于BVDV表位疫苗的研发；利用E2抗原多表位融合肽制备的ELISA检测试剂盒可用于牛群的BVDV抗体检测，具有特异性强、敏感性高、重复性好、易于操作的优点。
📄 2018104213081
📂 G01N33_68
👤 山东师范大学
📅 2018-05-04
本发明涉及文物检测领域，公开了一种基于免疫印迹法检测古代毛织品残片的方法，本发明先制备了碳量子点标记的羊毛二抗，之后用金属盐法和还原法提取现代羊毛和古代毛织品残片，进行SDS‑PAGE凝胶电泳，用碳量子点溶液进行染色，观察电泳图像。将得到的蛋白条带转移到聚偏氟乙烯膜上，经羊毛一抗和碳量子点标记的二抗孵育后，可在凝胶成像系统中观察到免疫条带，鉴定古代毛织品。本发明中化学试剂用量少，反应温和、环保无害；在对古代毛织品进行检测时，具有样品用量少、灵敏、准确、直观等优点。
📄 2018109686503
📂 G01N33_68
👤 浙江理工大学
📅 2018-08-23
本发明涉及牛毛检测技术领域，公开了一种分析牛毛角蛋白中氨基酸键合折叠分布的方法。本发明先采用酸性洗毛的工艺去除牛毛的油脂、杂质，将牛毛分组，然后利用排列组合的方法用不同蛋白酶对牛毛由外向内依次酶解，对于仅用过酸性蛋白酶酶解的牛毛用三(2‑羧乙基)膦特异地断裂二硫键，先用氨基酸分析对未断二硫键的各组牛毛进行氨基酸的测定，得到氨基酸在牛毛角蛋白中的径向分布，再对比断裂二硫键前后的组别，得到氨基酸键合折叠分布。本发明根据牛毛角蛋白中氨基酸分布具有不同层次的特点，采用排列组合的多次酶解法对角蛋白进行溶解，对氨基酸的破坏小，准确性高，特异性强，方法较为环保。
📄 2018109699310
📂 G01N33_68
👤 浙江理工大学
📅 2018-08-24
本发明涉及羊毛检测技术领域，公开了一种分析羊毛角蛋白中氨基酸键合折叠分布的方法。本发明先采用中性洗毛的工艺去除羊毛的油脂、杂质，将羊毛分成12等份，然后采用排列组合的方法用不同蛋白酶对羊毛由外向内逐层酶解，对于仅用过酸性蛋白酶酶解的羊毛用三(2-羧乙基)膦特异地断裂二硫键，先对未断二硫键的各组羊毛进行氨基酸分析，得到氨基酸的径向分布，再对比断裂二硫键前后的组别，得到羊毛角蛋白中氨基酸键合折叠分布。本发明根据羊毛角蛋白中氨基酸分布具有不同层次的特点，采用排列组合的多次酶解法对角蛋白进行溶解，对氨基酸的破坏小，准确性高，特异性强，方法较为环保。
📄 2018109699363
📂 G01N33_68
👤 浙江理工大学
📅 2018-08-24
本发明公开了一种新型冠状病毒SARS‑CoV‑2中和抗体定量检测试剂盒，由设在盒体内的包被有新冠病毒S1蛋白的微孔板1、包被有AXL蛋白和ACE2蛋白的微孔板2、中和抗体标准品溶液、阳性对照、阴性对照、样品稀释液、重组RBD+NTD蛋白酶结合物、20×浓缩洗涤液、显示液A、显示液B、终止液和说明书构成。本发明还公开了所述试剂盒在检测含新型冠状病毒中和抗体生物样品中的应用。根据试剂盒测定的中和抗体浓度可以有效推定微量细胞中和试验中和抗体滴度，用于接种新型冠状病毒疫苗后中和抗体产生评估。本发明的试剂盒灵敏度、特异性好，对于临床准确评估疫苗效果具有重要价值。
📄 202111025551X
📂 G01N33_68
👤 山东莱博生物科技有限公司
📅 2021-09-02
已申报项目
本发明公开了一种一步法新型冠状病毒中和抗体磁性微球检测试剂盒，由设在盒体内的偶联有重组人ACE2受体蛋白(ACE2‑hFc)的磁微球、作为阳性对照的RBD中和抗体标准品溶液、阴性对照、样品稀释液、RBD蛋白(HRP‑RBD)酶结合物、20×浓缩洗涤液、发光液构成。本发明还公开了所述试剂盒在检测含新型冠状病毒中和抗体生物样品中的应用。实验证实本发明的试剂盒稳定性高、选择性强，检测速度快、费用低廉、易于操作，克服了现有技术中检测中和抗体时，实验室环境要求高、操作时长等缺点，将操作时间由120分钟缩短至20分钟。具有极大的临床应用前景。
📄 2021102121903
📂 G01N33_68
👤 山东莱博生物科技有限公司
📅 2021-02-25
已申报项目
本发明公开了一种新型冠状病毒中和抗体酶联免疫法检测试剂盒，由设在盒体内的包被有RBD蛋白的微孔板、作为阳性对照的RBD中和抗体标准品溶液、阴性对照、样品稀释液、重组ACE2蛋白酶结合物、20×浓缩洗涤液、显示液A、显示液B、终止液和说明书构成。本发明还公开了所述试剂盒在检测含新型冠状病毒中和抗体生物样品中的应用。实验证实本发明的试剂盒稳定性高、选择性强，检测速度快、费用低廉、易于操作，克服了现有技术中检测中和抗体时，实验室环境要求高、操作时长等缺点，操作时间由120分钟缩短至45分钟，具有极大的临床应用前景。
📄 2021102110519
📂 G01N33_68
👤 山东省大健康精准医疗产业技术研究院
📅 2021-02-25
已申报项目
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