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本发明属于抗菌防腐剂及食品保鲜包装材料领域，具体涉及一种乳酸链球菌素/壳聚糖纳米粒子抗菌膜及制备方法和用途。通过将乳酸链球菌素与γ‑聚谷氨酸交联，随后加入壳聚糖，使其与γ‑聚谷氨酸交联制备得到负载乳酸链球菌素的γ‑聚谷氨酸/壳聚糖纳米粒子，以改善乳酸链球菌素在使用过程中生物活性减少的缺陷，提高其利用率。随后将负载了乳酸链球菌素的壳聚糖纳米粒子通过静电纺丝的方法制成抗菌膜，以减少壳聚糖纳米粒子直接在食品表面喷洒时出现的聚集和下降现象，避免封装物质生物活性的降低，从而达到长效抗菌与高效利用的目的。本发明操作简单，将抗菌膜应用于奶酪制品的保鲜可有效抑制致病微生物的生长，延长制品的保质期。