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一种多域蛋白质Linker构建方法,首先,根据未封闭的残基之间的Cα原子距离确定需要构建的Linker氨基酸序列长度;然后,通过随机游走的方式确定Linker中所有Cα原子的坐标,并通过原子冲突和封闭性检验判断所生成的Cα原子的有效性;其次,利用Pulchra方法生成其它原子,并利用蒙特卡罗算法对整个结构进行调整,同时根据二面角、原子冲突和键角等能量指导算法进行搜索;最后,根据蛋白质结构精修工具对最终结果进行精修,从而得到Linker的结构。本发明提供一种预测精度和效率均较高的多域蛋白质Linker构建方法。
📄 2018104380309 📂 G06F19_22 👤 浙江工业大学 📅 2018-05-09
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本发明公开了一种糖基转移酶突变体及其应用,所述突变体是将SEQ ID NO.4所示氨基酸序列第58位、第181位或第371位氨基酸进行单突变或多突变,或者将SEQ ID NO.6所示氨基酸序列第54位、第152位、第241位或第272位氨基酸进行单突变或多突变获得的。本发明利用同源建模和序列同源性分析对糖基转移酶进行理性改造,筛选得到酶活明显提高的糖基化转移酶突变体。与野生型相比,突变体UGTM1‑3、UGTM2‑4的相对酶活较改造前,分别提高了2.88倍和3.60倍,具有较大的工业应用潜力。
📄 2024116164556 📂 C12N9_10 👤 浙江工业大学 📅 2024-11-13
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本发明公开了一种腺苷酰化蛋白A6突变体以及其编码基因,以及其作为腺苷酰化结构域关键酶在催化合成多粘菌素中的应用。所述腺苷酰化蛋白A6突变体由氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的腺苷酰化蛋白A6第516位氨基酸经点突变而得。本发明利用基因工程和酶工程手段,对A域的活性位点进行研究,通过构建突变体确定了与A域底物特异性相关的关键氨基酸残基(A6第516位残基),本发明获得的突变体G516A与腺苷酰化蛋白A6相比,底物特异性发生改变,对L‑Ala的活性大幅提高,出现了对L‑Arg的活性,证明对该位点的氨基酸残基进行改造能够改变腺苷酰化蛋白的底物识别,为多粘菌素家族化合物结构的扩展提供了新的途径。
📄 2021105317802 📂 C12N9_10 👤 浙江工业大学 📅 2021-05-17
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本发明涉及一种具备D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶功能的耐高温TIM barrel蛋白突变体,及其在催化D‑果糖异构化制备D‑阿洛酮糖中的应用。所述TIM Barrel蛋白突变体,由序列如SEQ ID NO.1所示氨基酸经定点突变而得,所述点突变位点为下列中的一个或多个:(1)第241位、(2)第182位、(3)第201位、(4)第105位、(5)第30位。本发明有益效果主要体现在:本发明提供了一种全新的TIM Barrel蛋白酶突变体,该突变体具有超高酶活、较高最适反应温度和底物转化率,解决了现有酶催化制备D‑psicose效率低下的技术难题。使用本突变体生产D‑psicose,产物得率最高可达53.68%,优于原始酶和其他突变酶的转化效果,具有较好工业应用前景。
📄 2019113785135 📂 C12N9_90 👤 浙江工业大学 📅 2019-12-27
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本发明公开了具有抗菌活性的Sericin3蛋白的重复基序及其应用,Sericin3蛋白的重复基序的氨基酸序列如SEQ ID NO.9所示,分子大小为5kDa的多肽对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和藤黄微球菌都具有抗菌活性,由于丝胶重复单元大大缩短了蛋白质的分子量,从而降低了通过化学法合成多肽的成本与难度,本发明具有生产成本低、活性高、稳定性强、简便快捷等明显优点,能够用于大量获得具有抗菌活性的Sericin奠定了基础。
📄 202211030502X 📂 C07K14_435 👤 西南大学 📅 2022-08-26
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本发明公开了链霉亲和素突变体StrepTactin的Y43A突变蛋白及其应用,所述Y43A突变蛋白为链霉亲和素突变体StrepTactin的43位酪氨酸突变为丙氨酸,所述Y43A突变蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.5所示,突变后的蛋白与Biotin的结合减弱,使得Biotin与其作用变得可逆,用Y43A突变蛋白富集生物素标记蛋白,Y43A突变蛋白显示出较高的洗脱率,树脂残留低,能够用于生物素标记蛋白的纯化和富集。
📄 2023103867718 📂 C07K14_36 👤 西南大学 📅 2023-04-12
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本发明公开了链霉亲和素第27位丝氨酸突变的突变蛋白S27V及其应用,突变蛋白为野生型链酶亲和素的44‑47位氨基酸为VTAR,以及在野生型链酶亲和素27位的丝氨酸突变为不同的氨基酸,突变后的蛋白与Strep tagⅡ结合力增加,提高了其对单Strep和TwinStrep融合蛋白的纯化能力,同时与Biotin的结合减弱,使得Biotin与其作用变得可逆,洗脱后进行洗涤再生可再次利用,因此能够更好的用于Biotin修饰蛋白和Strep tagⅡ标签蛋白纯化。
📄 202311231134X 📂 C07K14_36 👤 西南大学 📅 2022-02-14
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本发明公开了链霉亲和素第27位丝氨酸突变的突变蛋白S27K及其应用,突变蛋白为野生型链酶亲和素的44‑47位氨基酸为VTAR,以及在野生型链酶亲和素27位的丝氨酸突变为不同的氨基酸,突变后的蛋白与Strep tagⅡ结合力增加,提高了其对单Strep和TwinStrep融合蛋白的纯化能力,同时与Biotin的结合减弱,使得Biotin与其作用变得可逆,洗脱后进行洗涤再生可再次利用,因此能够更好的用于Biotin修饰蛋白和Strep tagⅡ标签蛋白纯化。
📄 2023112311354 📂 C07K14_36 👤 西南大学 📅 2022-02-14
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本发明公开了一种家蚕卵胶蛋白的氨基酸截短蛋白,该卵胶蛋白的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,卵胶蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。将SEQ ID NO.1所示序列连接到蛋白表达载体上,并在酵母细胞内诱导表达,分离得到粗提的卵胶蛋白,过镍柱纯化,然后经转谷酰胺酶催化交联得到具有较高粘性的重组卵胶蛋白,通过剪切拉伸强度测试发现其粘性达到2.2MPa,强于家蚕丝胶的粘性(1.2MPa),甚至强于商业胶水PVP胶(1.2MPa)、PVA胶(1.4~1.8MPa)和UHU胶(1.8MPa)的粘性,本方法生产的家蚕卵胶蛋白可用于制备具有良好的胶黏强度的生物胶水。
📄 2021101580042 📂 C07K14_435 👤 西南大学 📅 2021-02-04
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本发明公开了Seroin蛋白的截短体及其应用,Seroin蛋白的截短体为Seroin1、Seroin2或Seroin3的N端或C端片段;截短后的多肽具有抗菌活性,能够用于抗革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌,通过截短大大缩短了蛋白质的分子量,从而降低了通过化学法合成多肽的成本与难度,与此前完整蛋白的生产技术,本发明具有生产成本低、活性高、稳定性强、简便快捷等明显优点。
📄 2020112802850 📂 C07K14_435 👤 西南大学 📅 2020-11-16
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本发明公开了可逆结合生物素的链霉亲和素突变蛋白及其应用,突变蛋白为野生型链酶亲和素的44‑47位氨基酸残基为VATR,并将链酶亲和素27位的丝氨酸突变为苏氨酸,或120位的色氨酸突变为组氨酸。突变后的蛋白与Strep tagⅡ结合力增加,提高了其对单Strep和TwinStrep融合蛋白的纯化能力,同时与Biotin的结合减弱,使得Biotin与其作用变得可逆,洗脱后用缓冲液进行简单洗涤再生可再次利用,因此能够更好的用于Biotin修饰蛋白和StreptagⅡ标签蛋白纯化。
📄 2022101350577 📂 C07K14_36 👤 西南大学 📅 2022-02-14
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本发明公开了链霉亲和素第27位丝氨酸突变的突变蛋白及其应用,突变蛋白为野生型链酶亲和素的44‑47位氨基酸为VATR,以及在野生型链酶亲和素27位的丝氨酸突变为不同的氨基酸,突变后的蛋白与Strep tagⅡ结合力增加,提高了其对单Strep和TwinStrep融合蛋白的纯化能力,同时与Biotin的结合减弱,使得Biotin与其作用变得可逆,洗脱后进行洗涤再生可再次利用,因此能够更好的用于Biotin修饰蛋白和Strep tagⅡ标签蛋白纯化。
📄 2022101339879 📂 C07K14_36 👤 西南大学 📅 2022-02-14
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一种多域蛋白质Linker构建方法

2018104380309 · 浙江工业大学
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糖基转移酶突变体及其应用

2024116164556 · 浙江工业大学
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一种腺苷酰化蛋白A6突变体及其编码基因与应用

2021105317802 · 浙江工业大学
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耐高温TIM barrel蛋白突变体及其应用

2019113785135 · 浙江工业大学
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一种家蚕卵胶蛋白的截短蛋白及其应用

2021101580042 · 西南大学
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Seroin蛋白的截短体及其应用

2020112802850 · 西南大学
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