本发明公开了一种产两性霉素B的重组结节链霉菌及其应用，所述重组结节链霉菌是敲除结节链霉菌ZJB2016050(Streptomyces nodosus ZJB2016050)内两性霉素B的竞争支路后，再将SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.5所示功能基因串联序列导入获得的；通过导入功能基因，使两性霉素B骨架合成前体供给量全面提升，提高菌种对营养物质的利用率，改变目标产物的营养物质流向。通过敲除竞争支路提高AmB产量约20％，副产物两性霉素A降低40％，通过过表达串联功能基因验证提高三类前体乙酰辅酶A，丙二酰辅酶A和甲基丙二酰辅酶A大幅提升两性霉素B的产量，最终在5L发酵罐发酵，两性霉素B产量可达到16g/L。
📄 2019104512586
📂 C12N1_21
👤 浙江工业大学
📅 2019-05-28
本发明公开了一种产两性霉素B的重组结节链霉菌及其应用，所述重组结节链霉菌是敲除结节链霉菌ZJB2016050(Streptomyces nodosus ZJB2016050)内两性霉素B的竞争支路获得的；通过导入功能基因，使两性霉素B骨架合成前体供给量全面提升，提高菌种对营养物质的利用率，改变目标产物的营养物质流向。通过敲除竞争基因簇提高两性霉素B的产量，可提高两性霉素B产量25％，提高菌种在发酵过程中对培养基营养成分的利用率，缩短发酵周期从而降低染菌风险。
📄 2019104508275
📂 C12N1_21
👤 浙江工业大学
📅 2019-05-28
本发明公开了一种产两性霉素的重组结节链霉菌及其应用，所述重组结节链霉菌是将SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.4与SEQ ID NO.5所示的透明颤菌血红蛋白(Vhb)、S-腺苷甲硫氨酸合成酶(Metk)、两性霉素合成基因簇调控因子(AmphRIV)、次级代谢产物全局调控因子(AraC)以及红霉素强启动子ermE*p序列导入结节链霉菌(Streptomyces nodosus)ZJB2016050获得。通过导入并过表达上述基因，使重组结节链霉菌中，两性霉素B产量提高约45％，副产物两性霉素A产量降低60％，并缩短在发酵过程中菌体生长周期，达到提升生产效率的目的。
📄 201810147126X
📂 C12N1_21
👤 浙江工业大学
📅 2018-02-12
本发明涉及本发明涉及一种高通量诱变筛选高产两性霉素B结节链霉菌的方法，以及筛选到的诱变株，由诱变株获得的重组工程菌及应用。本发明筛选获得的一株高产两性霉素B结节链霉菌菌株——结节链霉菌(Streptomyces nodosus)ZJB2016050。本发明的有益效果主要体现在：1、通过高通量筛选高产两性霉素B菌种的方法，能够方便快速高效地检测两性霉素B的产量，提高了诱变育种和基因工程菌株的筛选或验证效率。2、诱变育种获得的结节链霉菌N5，相对原始菌株N3，两性霉素B产量提高了20％，能够作为基因工程菌的原始菌株。3、通过过表达功能基因分别提高两性霉素B的产量，其中乙酰辅酶A羧化酶1(acc1)提高两性霉素B产量20％。4、卡那霉素价格优廉、抗菌谱广、杀菌作用强，适用于工业中使用，对于企业总体收益率有较强提高作用，以实验室5L罐为计算，能降低成本约2000元/罐。
📄 2019104501651
📂 C12N13_00
👤 浙江工业大学
📅 2019-05-28
本发明涉及一种提高两性霉素B产量的补料控制发酵方法，通过控制发酵体系pH、温度、DO值、葡萄糖浓度和添加外源添加物达到提高提高两性霉素B产量的目的。本发明分阶段发酵调控策略能够提供结节链霉菌一个最佳的菌体生长和产物合成的外部环境，有利于两性霉素B的积累；同时补料调控则通过补料培养基和外源化合物的补料，避免了营养物质在发酵过程中的消耗，后期得不到必要的补充的问题。采用本发明发酵方法，两性霉素B放罐单位可以达到16g/L以上，生产成本较目前的先进水平降低15％左右，所得两性霉素B发酵液中，副产物两性霉素A下降了30％以上，降低了后期分离纯化的难度。
📄 2020100596072
📂 C12P19_62
👤 浙江工业大学
📅 2020-01-19
本发明涉及一种基于两性霉素B代谢途径的发酵方法，所述方法包括：将结节链霉菌接种至发酵培养基，25～30℃、150～250r/min条件下培养96～168h，在发酵培养第12～36h内向发酵液中添加关键差异代谢物质，发酵结束后，发酵产物经分离纯化获得所述的两性霉素B。通过在AMB发酵培养至12～36h添加各种关键差异代谢物，来提高AMB的发酵水平。从本发明实施例中可以看出，发酵培养24h添加丙酮酸可以使AMB的产量由5360mg/L提高至6645mg/L；在培养基中添加D‑泛酸钙或烟酰胺可使AMB产量分别提高18.6％和12.5％。
📄 2019104467754
📂 C12P19_62
👤 浙江工业大学
📅 2019-05-27
本发明公开了一种产两性霉素B的重组结节链霉菌及其应用，所述重组结节链霉菌是将SEQ ID NO.1所示卡那霉素抗性基因序列导入结节链霉菌(Streptomyces nodosus)ZJB2016050获得的；通过导入卡那霉素抗性基因，使原本不具抗性的生产菌株带有卡那霉素抗性，提高种子培养基的菌种纯度和质量，实验室种子培养未出现染菌现象。通过表达功能基因透明颤菌血红蛋白(vhb)，提高AmB产量约15％；通过表达功能基因S‑腺苷甲硫氨酸合成酶基因(metk)，提高AmB产量约40％。
📄 2017109624926
📂 C12N1_21
👤 浙江工业大学
📅 2017-10-17
本发明涉及一种消除副产物AmA且高产两性霉素B的重组结节链霉菌，由如下方法构建获得：以结节链霉菌CCTCC NO：M 2017426为底盘菌，突变其聚酮合酶ER5结构域关键氨基酸位点，再导入SEQ ID NO.1～5所示基因的串联基因获得。本发明有益效果主要体现在：(1)本发明获得的突变菌株具有完全不产副产物AmA的特性，便于工业化生产分离纯化，同时AmB产量进一步提高；(2)过表达中心碳代谢及脂肪酸代谢途径关键基因，加强菌株对碳源的摄取，提高碳源转化率，进一步提高了AmB产量。
📄 2021110604915
📂 C12N1_21
👤 浙江工业大学
📅 2021-09-10
本发明涉及一种两性霉素B纳米复合物及其制备方法和应用，属于药物制剂技术领域。本发明通过两性霉素B与植物鞘氨醇的分子间作用力，形成以两性霉素B高度聚集体形式的纳米复合物。与现有技术相比，本发明能够有效减小两性霉素B的溶血毒性、肾细胞毒性和急性毒性，同时具有良好的体内外抗真菌活性。另外本发明还提供了该纳米复合物的制备方法，在治疗全身性深部真菌感染方面具有广阔的市场前景。
📄 2024113236980
📂 A61K31_7048
👤 西南大学
📅 2024-09-23
本发明涉及一种基于鞘氨醇偶联聚乙二醇载体的两性霉素B纳米复合物及其制备方法和应用，属于药物制剂技术领域。本发明通过鞘氨醇上的氨基与聚乙二醇活化酯进行偶联反应，得到水溶性的鞘氨醇‑聚乙二醇偶联物。将其作为载体材料，在两性霉素B与鞘氨醇的分子间作用力下，与药物分子形成高度聚集体形式的纳米复合物。与现有技术相比，本发明能够有效减小两性霉素B的溶血毒性、肾细胞毒性和急性毒性，同时具有良好的体内外抗真菌活性。另外本发明还提供了该载体和纳米复合物的制备方法，在治疗全身性深部真菌感染方面具有广阔的市场前景。
📄 2024113236923
📂 A61K47_18
👤 西南大学
📅 2024-09-23
本发明涉及一种pH响应性两性霉素B衍生物及其制备方法和应用，属于药物化学制备技术领域。本发明的衍生物通过对两性霉素B分子中海藻糖胺上的氨基进行修饰，得到一种新型结构的两性霉素B衍生物，其与未修饰前的两性霉素B相比，具有肾毒性低、溶血作用小、安全性高的特点。另外本发明还提供了该衍生物的制备方法，同样具有产率高，制备的衍生物具有较好的抗真菌效果，在治疗全身性深部真菌感染方面具有广阔的市场前景。
📄 2021108389287
📂 C07H17_08
👤 西南大学
📅 2021-07-23
本发明公开了一种共载两性霉素B和阿霉素的靶向药物组合物及其应用，属于药物和药剂学领域。本发明提出了一种新型利什曼病治疗的药物组合物，利用两性霉素B和具有荧光示踪性的阿霉素两种药物被同时负载于一个生物安全性良好的具有pH响应性药物载体材料中形成药物组合物，其中载体材料由具有主动靶向巨噬细胞的亲水性甘露糖残基、β‑环糊精、疏水性丙酰基组成。本发明药物组合物的生物安全性(细胞毒性、溶血毒性)较好，稳定性、pH响应药物释放性、靶向能力及治疗效率都在细胞模型中得到了验证，同时实现了两性霉素B和阿霉素的协同作用，大大降低了药物的用量，减轻副作用和患者经济负担，有望在临床应用上发挥巨大作用。
📄 2019111204607
📂 A61K9_107
👤 江南大学
📅 2019-11-15
柿子坊 · 知识产权运营
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