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本发明涉及一种醛缩酶基因salA及其在构建高产ADD基因工程菌中的应用，以及高产ADD的分枝杆菌基因工程菌及其构建与其在微生物发酵制备1,4‑雄二烯‑3,17‑二酮中的应用。所述高产ADD的分枝杆菌基因工程菌是以分枝杆菌为底盘菌，依次敲除kshA1、MnOpccR、salA基因获得。本发明所提供的基因工程菌株有效地控制了副产物的生成，大大提高甾体底物的利用率和产物的摩尔转化率，简化了后处理的过程，该策略还可以应用在同类型的新金色分枝杆菌进行植物甾醇为底物，微生物转化侧链降解合成AD和9‑OH‑AD等共性合成路径的产物合成，完全阻断4‑HBC，1，4‑HBC副产物合成，在提升底物植物甾醇的利用率的同时抑制副产物累积减少下游分离的负担，具有一定的普适性，适合于大力推广应用，具有较高的经济效益和社会效益。

本发明公开了一种新奥尔良分枝杆菌WCJ及其在降解有机污染物中的应用，所述的应用是将新奥尔良分枝杆菌WCJ接种至pH＝4‑9、含有机污染物的无机盐培养液中，在25‑35℃条件下进行培养，实现有机污染物的降解。本发明新奥尔良分枝杆菌WCJ对于正己烷具有高效的降解效果，可以较为完全地把污染物转化为CO2、H2O等无害物质；同时，该菌株也能不同程度地降解其他乙酸丁酯、石油醚、乙醇等工业常见污染物，因而在工业废气废水的生物净化中具有广阔的应用前景。

一种新金色分枝杆菌工程菌的基因编辑方法及系统，属于基因工程技术领域。本发明公开的编辑系统包括pMV261‑rAPOBEC/n(d)Cas9/UGI质粒和pTarget‑sgRNA质粒，pMV261‑rAPOBEC/n(d)Cas9/UGI质粒可以融合表达丧失切割活性的Cas9蛋白、胞嘧啶脱氨酶和尿嘧啶糖苷酶抑制剂，在sgRNA的引导下可在靶向目的基因，对序列N20片段中的胞嘧啶(C)进行脱氨反应，转变为尿嘧啶(U)，并在后续复制过程中变为胸腺嘧啶(T)形成TAG，TGA和TAA终止密码子，达到沉默或中断目的基因正常反应的目的。该系统对宿主的毒性低，可特异性编辑，且稳定传代，编辑效率最高可以达到50％。

本发明公开了氨基酸序列如SEQ ID No.2所示的重组分枝杆菌噬菌体尾蛋白GP89，其能够特异性识别耻垢分枝杆菌，还公开了GP89‑eGFP融合蛋白以及GP89重组蛋白功能化磁性纳米颗粒，三者可用于制备耻垢分枝杆菌检测试剂；以GP89重组蛋白功能化磁性纳米颗粒作为耻垢分枝杆菌特异性捕获试剂、GP89‑eGFP融合蛋白作为荧光探针构建的耻垢分枝杆菌夹心荧光检测法，具有快速、方便、特异、灵敏、准确的优点，有望应用于分枝杆菌的现场检测和快速筛查，能够为临床诊断、食品安全和环境检测等领域检测分枝杆菌提供有力的技术支持。

本发明公开了(E)‑2‑亚苄基‑3‑(环己基氨基)‑2,3‑二氢‑1H‑茚‑1‑酮在治疗分枝杆菌感染中的应用，其可抑制分枝杆菌的存活，有效治疗分枝杆菌的感染，从宿主免疫角度解决分枝杆菌感染的相关耐药性问题，为分枝杆菌感染的治疗提供新的手段。

本发明提供了一种用于结核分枝杆菌ESAT‑6抗原检测的电化学适体传感器，以MXene@Hemin‑AuNPs新型纳米酶为信号放大器，以N‑CNTs‑AuNPs为传感界面的夹心型电化学生物传感器，对结核病患者血清结核分枝杆菌特异性抗原ESAT‑6进行检测，为结核病的诊断提供了新方法。

本发明提供一种用于结核分枝杆菌特异性抗原MPT64检测的电化学适体传感器。本发明公开了一种以有序介孔碳CMK‑3与蒽醌‑2‑羧酸(AQ‑2‑COOH)所形成的纳米复合物CMK‑3/AQ‑2‑COOH为信号响应及放大材料，和以海胆状铈基金属有机框架(Ce‑MOF)和金纳米粒子(AuNPs)所形成的Ce‑MOF/AuNPs为传感界面的夹心型电化学适体传感器，用于结核病的病原体结核分枝杆菌特异性抗原MPT64的检测。结果表明，本发明中以Ce‑MOF/AuNPs为传感界面、CMK‑3/AQ‑2‑COOH为氧化还原探针，协同放大传感器的信号实现了对结核分枝杆菌特异性抗原MPT64的超灵敏检测，为结核病的诊断提供了新的检测方法。

本发明提供了一种检测牛结核分枝杆菌的试剂、试剂盒及检测方法，属于分子生物学检测技术领域；所述试剂包括基于CRISPR/Cas12a正反馈循环机制的识别元件、超支化杂交链式反应信号放大反应用试剂和比色分析用试剂；本发明以CRISPR/Cas12a为特异性识别元件，自催化后引发超支化杂交链式反应并形成n层分支的DNA纳米结构，并在DNA纳米结构上构建多维G‑四链体‑血红素DNA酶矩阵，从而实现多重信号放大，完成对牛结核分枝杆菌‑DNA的超灵敏检测。本发明对牛结核分枝杆菌DNA具有较高的特异性选择，检出限为8.9aM(LOD＝3σ/S)，实现了对牛结核分枝杆菌DNA的超灵敏检测。

本发明提供了一种基于DNAzyme双循环体系的牛结核分枝杆菌检测探针组及其检测方法，该检测探针组包括发夹型探针H1、发夹型探针H2、信号链S3和Pb2+，发夹型探针H1和发夹型探针H2均为茎环结构且均含有8‑17DNAzyme碱基序列，发夹型探针H1环部区中心位置和信号链S3中心位置均有8‑17DNAzyme特异性切割位点；发夹型探针H1连接有与牛结核分枝杆菌靶序列互补的碱基序列和引发链；发夹型探针H2包含有与引发链、信号链S3互补的碱基序列。本发明检测探针将Pb2+依赖型8‑17DNAzyme作为双循环信号放大体系的中心元件，实现牛结核杆菌检测信号高效放大的目的，同时本方法不依赖胞内酶系，能够在体外进行检测筛选，实现对牛结核分枝杆菌DNA的快速高灵敏检测。