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本发明通过多水平代谢工程策略首次实现了酿酒酵母以葡萄糖为碳源从头合成樱花素，首先在酿酒酵母中成功构建一条从葡萄糖开始生产樱花素的完整合成路径，接着强化樱花素前体对香豆酸、丙二酰辅酶A的供应来提供产率。本发明获得的代谢工程菌株发酵樱花素，是迄今报道的微生物法产樱花素的最高水平。

本发明以大肠杆菌W3110为底盘细胞，通过代谢改造，得到L‑酪氨酸高产大肠杆菌WTY8菌株。在WTY8菌株中表达来源于拟南芥的芳香醛合酶基因，实现了在大肠杆菌能够以葡萄糖为底物从头合成酪醇，其成本低廉且产量高，有利于工业化的生产。

本发明公开了一种脯氨酸亚细胞分离方法，取水稻幼苗样品在磺基水杨酸中冰浴研磨成匀浆；研磨液在3000r/min离心5min；下层沉淀物a备用；上清液a在10000r/min离心30min，得到上清液b，沉淀物b；用Tris‑HCl溶液溶解混合；均浆取600g在4℃离心，沉淀物c为细胞壁部分；上清液c为细胞器部分；将上清液c和沉淀物c分别10000r/min离心30min，分别保留沉淀物d、沉淀物e；分别加入3％的磺基水杨酸溶解，继续10000r/min离心，再分别保留下部的沉淀物f、沉淀物g；分别加入3％的磺基水杨酸溶解，超声处理30min，沸水浴30min，4℃3000r/min离心10min，得到的上清液d、上清液e分别为细胞器和细胞壁组分。可以方便直接的测定亚细胞结构中脯氨酸含量。

本发明公开了一种基于辅因子代谢工程策略改造蛹虫草菌提高虫草素产量的方法及应用。本发明利用根癌农杆菌介导遗传转化技术将过表达葡萄糖‑6‑磷酸脱氢酶编码基因gsdA和/或6‑磷酸葡萄糖酸脱氢酶编码基因gndA的重组载体导入蛹虫草中，构建蛹虫草重组菌株，强化了胞内NADPH的供应，经液体深层发酵虫草素发酵产量显著提高。过表达gsdA的重组菌株液体发酵第20d虫草素产量达到了191.95mg/L，较野生型蛹虫草产量提高150.86％；过表达gndA的重组菌株液体发酵第20d虫草素产量达到了764.48mg/L，较野生型蛹虫草产量提高1034.02％。本发明提出的基于辅因子代谢工程策略改造蛹虫草菌构建重组工程菌株的方法，为高产虫草素的蛹虫草菌株的选育提供了新的方向。