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本发明公开了一种可常温运输的环介导等温扩增试剂、制备方法及应用，该试剂包括Bst DNA Polymerase、dNTP、引物混合物、指示剂、保护剂和气溶胶污染预防剂；将上述组分混合，在‑70～‑80℃下冷冻干燥8～16h，即可得环介导等温扩增试剂。本发明制备了一种用于核酸检测的环介导等温扩增试剂，能够常温运输保存，运输方便，稳定性好；同时解决了气溶胶污染限制了LAMP技术推广的问题，大大降低了LAMP技术的应用和推广难度。试剂中Bst DNA Polymerase活性为150％，可常温保存一年以上，使用时仅需加入缓冲液即可，操作简单，DNA聚合酶活性高，检测灵敏度无损失，保护剂干扰小，成本低廉。

本发明公开了一种核酸免提取试剂及其在核酸检测中的应用和使用方法，属于核酸检测技术领域，该核酸免提取试剂是由海藻糖、PEG8000、Tris‑HCl、EDTA、Triton X‑100及核酸释放剂组成的混合液体；本发明通过Triton X‑100和核酸释放剂的协同作用，能够高效裂解病原微生物，快速释放其中的DNA或RNA。一方面，通过EDTA能够鳌和金属离子，降低DNase和RNase的酶活，另一方面，通过海藻糖和PEG8000在RNA和DNA表面形成保护层，使其能够在溶液中稳定存在。最后通过Tris稳定该试剂的pH，以确保RNA或DNA均可稳定保存。通过上述组份的协同作用，本发明的核酸免提取试剂能够在室温条件下直接完成核酸的释放，避免了加热、离心、洗涤等繁琐操作，所得产物可以直接用于PCR扩增。