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本公开属于生物分析技术领域，具体为一种同时检测hOGG1和hAAG的荧光传感器及其检测方法和应用。包括双功能哑铃探针、信号探针1和信号探针2；所述双功能哑铃探针包括T7启动子区域，并修饰有一个8‑oxoG和一个脱氧肌苷；所述信号探针1和2的5'端分别被不同的荧光团修饰，在3'端分别被不同的淬灭剂修饰。首次证明了可控T7转录激活的循环级联扩增在单分子水平同时检测人类8‑氧代鸟嘌呤DNA糖基化酶(hOGG1)和人类烷基腺嘌呤DNA糖基化酶(hAAG)，该方法具有良好的特异性和灵敏性，对hOGG1的检出限为3.52×10‑8U/μL，对hAAG的检出限为3.55×10‑7U/μL，甚至可以在单细胞水平定量修复糖基化酶活性。