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本发明涉及土壤生态技术领域，具体为一种利用土壤生物对污染土壤毒性试验装置，包括箱体，所述箱体内包括处理室和培养室，所述处理室包括加湿风道和干燥风道，所述干燥风道和加湿风道均与培养室连接，所述培养室的侧壁设有观察玻璃，所述培养室内交错设有至少三组隔板，所述隔板的上端滑动连接有培养盒，所述隔板的表面还设有通风口，所述培养盒的顶端设有顶板，所述顶板的表面设有通风网，所述顶板固定连接在箱体内壁，所述处理室内部还设有蜂窝式转轮；培养盒可对土壤进行采集，并在培养盒内培养土壤生物对土壤毒性进行评估，操作简便，成本较低，隔离板对培养室进行分层，透气孔起到透气透水的作用，处理室可对培养室内的空气湿度进行调节。