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0本发明公开了一种抗人线粒体外膜蛋白OMP25的单克隆抗体及其应用。该单克隆抗体为HC01‑R001，其亚型为IgG1、κ型，能与人线粒体外膜蛋白OMP25的膜外区特异性结合。产生该抗体的杂交瘤细胞是由免疫的BALB/C小鼠脾淋巴细胞和小鼠骨髓瘤细胞SP2/0经融合、筛选、克隆和传代流程筛选后获得的杂交瘤细胞，能稳定分泌HC01‑R001。该蛋白结构和功能较为简单，对线粒体影响较小，序列特异性高，且在不同物种间保守程度较高，是理想的线粒体外膜识别靶标，该抗体用途广泛，可用于人线粒体外膜蛋白的ELISA、Western Blotting、免疫荧光、免疫组化、流式细胞术等检测，以及免疫沉淀实验。