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本发明公开了一种增强拉曼散射活性的纳米金薄膜及其制备方法，所述增强拉曼散射活性的纳米金薄膜包括导电衬底和堆叠在导电衬底上的三维多层金纳米颗粒膜；所述三维多层金纳米颗粒膜的厚度为0.1‑2μm，金纳米颗粒为类球形多面体结构，颗粒粒径为150‑400nm。本发明提供的一种增强拉曼散射活性的纳米金薄膜及其制备方法，通过在导电衬底上附着金籽晶后，利用金籽晶为成核点，通过电沉积的方法在导电衬底上培育形成三维多层金纳米颗粒膜，该金纳米颗粒膜通过大粒径的金纳米颗粒相互堆叠组装形成，结构单一，且具有众多的表面增强拉曼散射(SERS)热点，有利于保证SERS信号的均匀性和高检测灵敏度。