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本发明属于生物催化领域，具体涉及一种固定化大肠杆菌制备胸苷的方法。本发明以PVA和卡拉胶为包埋基材，活性碳为添加剂，固定产磷酸化酶的大肠杆菌，得到固定化大肠杆菌；在制备胸苷的反应中，以固定化大肠杆菌为催化剂，以磷酸盐缓冲液为溶剂，2‑脱氧‑α‑D‑核糖‑1‑磷酸二环己基胺盐和胸腺嘧啶为反应底物，生产胸苷。本发明采用固定化大肠杆菌制备胸苷，较好的提高了菌体对底物的耐受性，其稳定性得到提高，使得制备胸苷的收率提高；结果表明，经提纯后，胸苷纯度可达97％以上，收率达90％以上；经过6批次反应后，固定化大肠杆菌无明显活力损失。

📄 2019100538888 📂 C12P19_38 👤 江苏香地化学有限公司 📅 2019-01-21

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一种β-胸苷的合成方法

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本发明公开了一种β‑胸苷的合成方法，采用酶工程逆向合成胸苷，使用葡萄糖脱氢酶、尿苷激酶、乌贼酸激酶、核糖核苷二磷酸还原酶、胸苷酸激酶以及胸苷激酶，以5‑甲基尿苷为原料，经过两个磷酸化步骤产生核苷酸，然后转化为脱氧核苷酸，再经两步脱磷酸化产生胸苷。本发明公开了一种β‑胸苷的合成方法，成本大大降低，缩短生产周期，减少工业废物，无毒环保。

📄 2017102731081 📂 C12P19_38 👤 江苏笃诚医药科技股份有限公司 📅 2017-04-25

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一种梯度pH法制备胸苷的方法

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本发明涉及一种梯度pH法制备胸苷的方法，以DNA水解液为底物与胸腺嘧啶混合，以固定化大肠杆菌细胞为催化剂反应制备胸苷，在制备过程中通过利用梯度pH法加入磷酸盐缓冲液调节体系反应前期、反应后期的pH值，可有效提高反应速率，大大缩短反应时间；利用包埋‑交联法制备固定化大肠杆菌，较好的提高了菌体对底物的耐受性，其中添加的活性炭能降低固定化大肠杆菌的内扩散阻力，有利于物质在固定化大肠杆菌中的扩散，有效提高反应速率，且固定化大肠杆菌细胞操作稳定性好，重复利用性高；采用本发明方法制备胸苷的工艺简单，转化率较好，收率达61％以上，提纯后胸苷纯度可达96％以上。

📄 2019100533780 📂 C12P19_38 👤 江苏理工学院 📅 2019-01-21

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