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本发明涉及文物保护领域，本发明公开了一种基于高能球磨法和冷冻干燥技术的抗菌性复合颜料汁绿的制备方法，包括：1)向明胶溶液中加入明矾，得到胶矾水配合液A；2)将苦参提取液、植物抗生素、薄荷脑、十二烷基磺酸钠、8‑羟基喹啉、乙醇和甘油加入到水中，加热搅拌，得到抗菌性混合液B；3)将胶矾水配合液A与抗菌性混合液B混合，得到抗菌性胶矾水C；4)将藤黄、靛蓝、朱磦加入水，放入球磨，冷冻干燥后得到复合汁绿颜料粉末D；5)将抗菌性胶矾水C与复合汁绿颜料粉末混合研磨，得到抗菌性复合汁绿颜料。本发明方法制备的颜料汁绿非常适用作植物颜料，并且还同时具备出色的抗菌性，即使在恶劣环境下也可有效缓解微生物对绢画的侵蚀。