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本发明公开了一种二苯并噻吩衍生物及其制备方法与应用，具体为2‑氰基‑3‑{2‑[5‑(4‑二苯并[b,d]噻吩基)]噻吩基}丙烯酸甲酯。该衍生物制备方法包括如下步骤：向反应容器中加入2‑[5‑(4‑二苯并[b,d]噻吩基)]噻吩醛、氰基乙酸甲酯、六氢哌啶和无水甲苯，在105‑115℃下搅拌反应5‑7小时，其中，2‑[5‑(4‑二苯并[b,d]噻吩基)]噻吩醛、氰基乙酸甲酯和六氢哌啶的物质的量比为(19‑21):(21‑23):1；反应结束后，将反应体系中有机溶剂浓缩，过滤，取滤饼，使用氯仿和石油醚混合溶剂重结晶即得。本发明2‑氰基‑3‑{2‑[5‑(4‑二苯并[b,d]噻吩基)]噻吩基}丙烯酸甲酯可以作为荧光检测的探针用于以荧光发射波长为指标检测四氢呋喃水溶液中的含水量，线性范围宽，准确度高。