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本发明公开一种连续性检测铁离子和L‑Cys的荧光探针及其制备方法和应用，该探针在1％的DMSO溶剂中能够与Fe3+络合，使得探针的荧光被猝灭，体系中加入L‑Cys后荧光恢复。本发明所述的探针分子不仅可以定性定量检测真实样品Fe3+和L‑Cys，而且在纸基检测方面具有较好的应用。不仅如此，探针Pyr‑1具有响应快速的特点：对于Fe3+来说，40秒内就能与探针络合完成，L‑Cys在50秒内就能够使得探针荧光恢复完全。同时该探针在不同pH条件下具有较好的稳定性，因此在生物化学等领域具有重要的应用价值。将该探针应用于铁离子和L‑Cys的检测时，具有合成路线简单、高选择性、响应快速、低检测限、受环境干扰小的特点。