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本发明提供了一种马勃活性成分的梯度分离与综合利用方法，步骤如下：马勃首先用乙醇提取，得到粗提物和提取渣，粗提液蒸发浓缩后得到乙醇和浸膏。浸膏用不同极性的溶剂分段洗脱可以得到不同的提取部位，这些不同提取部位蒸发浓缩可以分出溶剂得到多种细分提取物。细分提取物再通过反复分段洗脱可以得到单组份提取物，单组分提取物分出溶剂后可以得到纯净的单体化合物。该方法得到的粗提物、浸膏、各种提取部位、细分提取物和单体化合物根据性质的不同可以作为不同级别的产品分别利用，提取渣也可以用于制造畜禽饲料、栽培食用菌的材料或有机肥等。所述各种溶剂可以蒸发出来循环使用。该方法对马勃利用率高，近乎零排放，无环境污染，综合效益高。